桔梗多酚的提取、純化及抗氧化活性研究.pdf

1、桔梗，是桔?？?Campanuaceae)桔梗屬(Platycodon)多年生草本植物，是我國藥食同源的植物之一。桔梗富含皂苷、多酚、黃酮、多糖、萜類、甾體等成分，并含十余種氨基酸及鎂、鐵、鋅等多種微量元素，食用部分主要為地下莖，性平，味苦、辛，歸肺經(jīng)，具有止咳、化痰、排膿等的作用?，F(xiàn)代藥理研究顯示，桔梗具有保肝、抗氧化、抗炎、抗腫瘤、降血糖、降血脂、調(diào)節(jié)免疫等功效。
　　(1)通過預(yù)實驗確定了桔梗中含有皂苷類、糖及苷類、多酚類、

2、黃酮類、甾體及萜類、油脂類和有機(jī)酸等多種活性成分。通過比較乙醇回流提取法、超聲波輔助乙醇提取和超聲波輔助乙醇回流提取法，確定采用超聲波輔助乙醇回流提取法作為桔梗多酚的提取方法。通過單因素試驗及響應(yīng)面優(yōu)化法優(yōu)化得到乙醇提取桔梗多酚的最佳工藝條件為超聲時間32min，乙醇體積分?jǐn)?shù)62％，液料比21∶1(mL/g)，提取溫度62℃，超聲功率為450W，浸提時間為1.5h，此條件下提取所得桔梗多酚的最大得率為1.647mg/g。
　　(2

3、)將桔梗多酚粗提液經(jīng)過石油醚、乙酸乙酯萃取，再采用大孔吸附樹脂對桔梗多酚進(jìn)行了純化。經(jīng)比較，選擇AB-8作為純化用的樹脂。最佳純化條件為:pH值5.84，上樣流速為1.0mL/min，吸附時間為1.0h;采用60％乙醇作為洗脫劑，用2BV的洗脫劑洗脫，洗脫時流速為0.6mL/min。在此條件下，純化前桔梗多酚平均值由45.402mg/g可增加到94.013mg/g，總抗氧化能力平均值可由純化前的60.167 U/mL提高到122.047

4、U/mL。
　　(3)通過葡聚糖LH-20凝膠對桔梗多酚進(jìn)行分離，得到2個組分。利用紫外、紅外光譜分析，結(jié)果桔梗多酚在280nm處有最大的吸收峰，各功能團(tuán)引起的振動特征吸收峰均符合多酚類物質(zhì)的結(jié)構(gòu)。通過HPLC測定，進(jìn)一步驗證出桔梗多酚樣品中存在兒茶素和對羥基肉桂酸兩種多酚類化合物。運(yùn)用外標(biāo)法計算出桔梗多酚中兒茶素為8.226μg/mL，對羥基肉桂酸為6.050μg/mL，分別占桔梗多酚總量的41.13％和30.25％。
　

5、　(4)采用同濃度的精制桔梗多酚和抗壞血酸，通過T-AOC試劑盒比較了兩者的總抗氧化能力，精制桔梗多酚的總抗氧化能力不如抗壞血酸。通過清除O2-·自由基、·OH自由基、DPPH自由基能力來研究桔梗多酚的體外抗氧化能力，結(jié)果表明自由基的清除率與樣品濃度呈正相關(guān)。比較三種自由基的50％清除率的濃度(SC50)可知，·OH自由基清除率達(dá)50％時所需的桔梗多酚濃度最小，僅為0.11mg/mL。而O2-·自由基和DPPH自由基的SC50分別為0.