雪松松針總多酚的提取純化及其抗氧化活性研究.pdf

1、雪松Cedrus deodara(Roxb) G.Don是松科Pianaceae植物雪松屬Cedrus Trew樹(shù)種的泛稱，傳統(tǒng)中醫(yī)認(rèn)為雪松具有祛風(fēng)活絡(luò)、止血活血、消腫生肌功效；現(xiàn)代藥理研究表明，雪松具有抗氧化、抗病毒、抗褐變、抗腫瘤等藥理活性。雪松在我國(guó)分布廣泛，且其松針資源豐富。為開(kāi)發(fā)利用雪松松針，本論文針對(duì)雪松松針中酚酸類物質(zhì)的抗氧化活性進(jìn)行了比較系統(tǒng)的研究，主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下：
　　1.HPLC法同時(shí)測(cè)定雪松松針中酚酸

2、類物質(zhì)沒(méi)食子酸、原兒茶酸和兒茶素的含量：采用TC-C18（250nm×4.6mm,5μm）色譜柱，流動(dòng)相為甲醇-0.2％磷酸水溶液梯度洗脫(0-8 min,10%A→10%A；8-45 min,10%A→30%A)，流速1.0mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)280nm，柱溫25℃。結(jié)果表明，雪松松針中3個(gè)酚酸類化合物沒(méi)食子酸、原兒茶酸和兒茶素依次在0.4～4.0μg/mL、4～40μg/mL和2～20μg/mL濃度范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)在

3、0.9998～0.9999之間；加樣回收率（n=9）分別為104.70%、99.54%和105.84%。所建立的方法簡(jiǎn)單、快速、高效，適用于雪松松針中3個(gè)酚酸類成分的含量測(cè)定和質(zhì)量控制。
　　2.雪松松針中總多酚的含量測(cè)定與超聲提取工藝研究：以沒(méi)食子酸為對(duì)照品，采用酒石酸亞鐵分光光度法，在波長(zhǎng)550 nm處測(cè)定雪松松針中總多酚含量，并以總多酚的含量為指標(biāo)，在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，通過(guò)響應(yīng)面法對(duì)影響雪松松針總多酚提取工藝的主要因素（乙醇

4、濃度、提取時(shí)間、液料比）進(jìn)行分析優(yōu)化。結(jié)果表明：沒(méi)食子酸質(zhì)量在0~1265μg范圍內(nèi)與吸光度呈良好的線性關(guān)系( r=0.9997)，平均回收率和RSD分別為103.10%和1.99%；最佳工藝條件為55%乙醇，料液比1:20（g/mL），超聲提取65 min，提取次數(shù)為2次；在此最佳工藝條件下，總多酚的得率為5.46%。
　　3.大孔樹(shù)脂純化雪松松針中總多酚的工藝研究：以雪松松針總多酚的動(dòng)態(tài)吸附率為指標(biāo)篩選大孔樹(shù)脂，采用紫外分光光

5、度法測(cè)定雪松松針總多酚含量,對(duì)所篩選樹(shù)脂分離雪松松針總多酚工藝進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果表明：HPD-600大孔樹(shù)脂純化雪松松針總多酚效果最好，最優(yōu)工藝條件為：上柱液料濃度1.5 mg/mL，pH4.0-5.0，上柱體積8 BV，速率為2 BV/h，洗脫劑乙醇濃度70%，洗脫速率4 BV/h，洗脫體積3 BV。在此最佳工藝條件下，總多酚的純度由9.88%提高到34.65%。
　　4.雪松松針總多酚的抗氧化活性評(píng)價(jià)：采用DPPH自由基和ABTS