枇杷葉多酚提取、純化及其抗氧化、抑菌活性研究.pdf

1、本實驗以枇杷葉為材料，采用溶劑提取法提取枇杷葉多酚類物質(zhì)，并對其提取工藝進行優(yōu)化提高枇杷葉多酚的提取率，然后對提取多酚類物質(zhì)利用大孔樹脂進行純化，利用高效液相色譜法初步鑒定枇杷葉多酚類物質(zhì)的組成，最后采用多種方法研究枇杷葉多酚的抗氧化活性和抑菌活性。研究結(jié)論：
　　（1）利用響應(yīng)面分析法，優(yōu)化枇杷葉多酚提取工藝，結(jié)果表明料液比、提取溫度和提取時間是影響枇杷葉多酚提取率的最主要因素，乙醇濃度影響最小，枇杷葉多酚最優(yōu)提取工藝為料液比1

2、:21，乙醇濃度48.5％，溫度60℃，時間2.6 h，得到枇杷葉多酚實際提取率值為3.40%。
　?。?）通過比較六種大孔樹脂的吸附與解吸能力，選擇D101大孔樹脂來純化枇杷葉多酚，通過靜態(tài)和動態(tài)吸附實驗，得到D101樹脂純化枇杷葉多酚的方案：多酚濃度為2.0 mg/mL的溶液進行上樣，流速控制在2.0 mL/min；解吸劑選用60%的乙醇溶液，洗脫流速為1.0 mL/min，洗脫液體積為250 mL；最終收集合并100~200

3、 mL之間的洗脫液，經(jīng)過濃縮冷凍干燥得到枇杷葉多酚純樣粉末。該工藝經(jīng)過驗證，枇杷葉多酚的含量從13.23%上升到68.48%。
　　（3）利用高效液相色譜分析法初步研究枇杷葉多酚的組成，研究發(fā)現(xiàn)枇杷葉多酚粗樣和枇杷葉多酚純樣都含有五種相同的成分，分別是沒食子酸、香草酸、丁香酸、阿魏酸、槲皮素。通過定量分析結(jié)果為枇杷葉多酚粗樣中沒食子酸、香草酸、丁香酸、阿魏酸、槲皮素物種單體的含量分別為：1.057 mg/g、1.197 mg/g、

4、1.439 mg/g、2.234 mg/g、1.068 mg/g；枇杷葉多酚純樣中五種單體的含量分別為：12.731 mg/g、8.433 mg/g、8.651 mg/g、9.477 mg/g、18.554 mg/g。
　?。?）采用體外抗氧化實驗，研究枇杷葉多酚粗樣、純樣的抗氧化能力，并且以常用抗氧化劑抗壞血酸和應(yīng)用最廣泛的多酚類物質(zhì)茶多酚作為對照。本研究的數(shù)據(jù)顯示枇杷葉多酚顯示出較好的清除DPPH、ABTS+、羥自由基、亞硝基

5、的作用，并且還原能力顯著，可以作為潛在的天然抗氧化劑的來源。
　?。?）濾紙片法測定抑菌效果表明，純化后枇杷葉多酚對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌兩種細菌的抗菌效果最顯著，并且隨著多酚濃度的升高，抑制作用增加。枇杷葉多酚對枯草芽孢桿菌和銅綠假單孢桿菌的抑制效果較差，升高到一定濃度，其對枯草芽孢桿菌的抑菌效果趨于穩(wěn)定，濃度較小時，對銅綠假單孢桿菌沒有抑菌效果。通過肉湯微量稀釋法測定最低抑菌濃度和最低殺菌濃度的實驗結(jié)果表明枇杷葉多酚對大腸桿