馬尾松松針總木脂素提取純化工藝研究.pdf

1、目的:建立馬尾松松針中木脂素類成分的質量控制方法,優(yōu)選出馬尾松松針木脂素類成分的最佳提取純化工藝,為馬尾松松針中發(fā)揮藥效成分的進一步研究奠定基礎。
　　方法:(1)以新木脂素A為對照品,采用紫外分光光度法測定馬尾松松針50％乙醇回流提取物中總木脂素的含量,測定波長為281nm。(2)采用高效液相色譜技術對指標性成分massonianosideB[(7S,8R)-3’,9,9’-三羥基-3-甲氧基-7,8-二苯并呋喃-1’-丙基新木

2、脂素-4-O-α-L-鼠李糖苷]進行含量測定,色譜條件如下:色譜柱:phenomenexSynergi4uHydro-Rp80A(250×4.6mm,5μm);流動相:乙腈-6%冰醋酸(13:87);流速:0.8mL·min-1;檢測波長:281nm;柱溫:30℃。(3)采用紫外分光光度法和高效液相色譜法分別測定總木脂素的含量和指標性成分massonianosideB的含量,以提取量為考察指標,用正交設計的方法優(yōu)選最佳提取工藝。(4)運

3、用X-5、AB-8、D101、D4006、NKA-Ⅱ、DiaionHP-20六種不同類型的大孔吸附樹脂對馬尾松松針中總木脂素進行富集純化,以總木脂素和massonianosideB的含量以及總木脂素的吸附解析率為考察指標,篩選出最佳樹脂類型,并對最佳樹脂類型的純化條件分別進行篩選。
　　結果:(1)總木脂素含量達到25.18%,在0～0.12mg/mL(r=0.9997)范圍內呈良好的線性關系,平均回收率為96.06%,RSD=1

4、.63%。(2)massonianosideB含量達到0.78%,在3.08～18.48mg/mL(r=0.9993)范圍時呈良好的線性,平均回收率為100.03%,RSD=1.41%。(3)在提取工藝中,以總木脂素提取量為考察指標,確定最佳工藝為A3B2C3D3;以指標性成分為考察指標,其最佳工藝為A3B2C3D3。由于A因素三個水平無顯著性差異,結合木脂素的理化性質,為了節(jié)約成本,適應工業(yè)大生產的需要,我們確定提取工藝為A2B2C3

5、D3,即藥材加10倍量的50%乙醇,回流提取3次,每次3h。(4)純化工藝條件為:選用AB-8大孔吸附樹脂進行純化,馬尾松松針提取物的上樣濃度為40mg/mL,提取物與大孔吸附樹脂比為100:7(mg/mL),吸附流速為1mL/min,樹脂徑高比為1:7,用2倍量柱體積水除雜,6倍量柱體積50%乙醇洗脫,洗脫流速為2mL/min。
　　結論:方法學考察表明,建立的馬尾松松針中總木脂素和指標性成分massonianosideB的含量