馬尾松松針總木脂素提取純化工藝研究.pdf

1、目的:建立馬尾松松針中木脂素類成分的質(zhì)量控制方法,優(yōu)選出馬尾松松針木脂素類成分的最佳提取純化工藝,為馬尾松松針中發(fā)揮藥效成分的進(jìn)一步研究奠定基礎(chǔ)。
　　方法:(1)以新木脂素A為對(duì)照品,采用紫外分光光度法測(cè)定馬尾松松針50％乙醇回流提取物中總木脂素的含量,測(cè)定波長(zhǎng)為281nm。(2)采用高效液相色譜技術(shù)對(duì)指標(biāo)性成分massonianosideB[(7S,8R)-3’,9,9’-三羥基-3-甲氧基-7,8-二苯并呋喃-1’-丙基新木

2、脂素-4-O-α-L-鼠李糖苷]進(jìn)行含量測(cè)定,色譜條件如下:色譜柱:phenomenexSynergi4uHydro-Rp80A(250×4.6mm,5μm);流動(dòng)相:乙腈-6%冰醋酸(13:87);流速:0.8mL·min-1;檢測(cè)波長(zhǎng):281nm;柱溫:30℃。(3)采用紫外分光光度法和高效液相色譜法分別測(cè)定總木脂素的含量和指標(biāo)性成分massonianosideB的含量,以提取量為考察指標(biāo),用正交設(shè)計(jì)的方法優(yōu)選最佳提取工藝。(4)運(yùn)

3、用X-5、AB-8、D101、D4006、NKA-Ⅱ、DiaionHP-20六種不同類型的大孔吸附樹脂對(duì)馬尾松松針中總木脂素進(jìn)行富集純化,以總木脂素和massonianosideB的含量以及總木脂素的吸附解析率為考察指標(biāo),篩選出最佳樹脂類型,并對(duì)最佳樹脂類型的純化條件分別進(jìn)行篩選。
　　結(jié)果:(1)總木脂素含量達(dá)到25.18%,在0～0.12mg/mL(r=0.9997)范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,平均回收率為96.06%,RSD=1

4、.63%。(2)massonianosideB含量達(dá)到0.78%,在3.08～18.48mg/mL(r=0.9993)范圍時(shí)呈良好的線性,平均回收率為100.03%,RSD=1.41%。(3)在提取工藝中,以總木脂素提取量為考察指標(biāo),確定最佳工藝為A3B2C3D3;以指標(biāo)性成分為考察指標(biāo),其最佳工藝為A3B2C3D3。由于A因素三個(gè)水平無顯著性差異,結(jié)合木脂素的理化性質(zhì),為了節(jié)約成本,適應(yīng)工業(yè)大生產(chǎn)的需要,我們確定提取工藝為A2B2C3

5、D3,即藥材加10倍量的50%乙醇,回流提取3次,每次3h。(4)純化工藝條件為:選用AB-8大孔吸附樹脂進(jìn)行純化,馬尾松松針提取物的上樣濃度為40mg/mL,提取物與大孔吸附樹脂比為100:7(mg/mL),吸附流速為1mL/min,樹脂徑高比為1:7,用2倍量柱體積水除雜,6倍量柱體積50%乙醇洗脫,洗脫流速為2mL/min。
　　結(jié)論:方法學(xué)考察表明,建立的馬尾松松針中總木脂素和指標(biāo)性成分massonianosideB的含量