羅哌卡因、丁卡因?qū)τ淄眉顾韬图股窠?jīng)的毒性作用及其機(jī)制.pdf

1、目的：觀察不同濃度羅哌卡因(Ropivacaine，Rop)、丁卡因注入幼兔蛛網(wǎng)膜下腔后對(duì)脊髓、脊神經(jīng)的毒性作用，局麻藥致幼兔脊髓、脊神經(jīng)毒性損傷后細(xì)胞凋亡現(xiàn)象及其可能機(jī)制。 方法：日本大耳白幼兔120只，隨機(jī)分為0．25％、O．5％、0．75％三種濃度Rop組(Ro．25組、R0.5組、Ro．75組)，0．9％生理鹽水陰性對(duì)照組(S組)和2％丁卡因陽(yáng)性對(duì)照組(T組)五個(gè)大組，每組24只。五組又分別隨機(jī)分為3h組、6h組、7d組

2、三小組，共15個(gè)小組，每組8只。所有幼兔行左總頸動(dòng)脈穿刺置管后監(jiān)測(cè)血流動(dòng)力學(xué)變化。利用鞘內(nèi)給藥技術(shù)，于L6,7穿刺后，20秒內(nèi)注入不同濃度Rop，生理鹽水或2％丁卡因各0．2ml。注藥開(kāi)始同期觀察幼兔的雙后肢運(yùn)動(dòng)功能變化。分別于注藥后3h、6h、7d三個(gè)時(shí)相點(diǎn)處死幼兔，取L5，6段脊髓，應(yīng)用透射電鏡，HE染色觀察神經(jīng)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化。使用TUNEL法鏡下觀察凋亡陽(yáng)性標(biāo)記的細(xì)胞數(shù)，統(tǒng)計(jì)凋亡指數(shù)(apoptosisindex，AI)。采用免

3、疫組化法檢測(cè)各組三個(gè)時(shí)相點(diǎn)脊髓神經(jīng)細(xì)胞凋亡相關(guān)基因(Bax、Bcb2)的表達(dá)情況。 結(jié)果：各組給藥前后的平均動(dòng)脈壓(MAP)均>60mmHg，各組MAP在給藥前后及組間差異無(wú)顯著性(P＞0．05)。鞘內(nèi)給藥后，Rop組(R0．25組、R0.5組、R0.75組)兔子雙后肢均出現(xiàn)不同程度的運(yùn)動(dòng)功能阻滯，給藥后3h，所有Rop組幼兔的運(yùn)動(dòng)功能均已完全恢復(fù)正常。Rop濃度與兔運(yùn)動(dòng)阻滯顯效時(shí)間和運(yùn)動(dòng)阻滯持續(xù)時(shí)間成線性關(guān)系，隨著Rop濃度的

4、升高，顯效時(shí)間縮短，持續(xù)時(shí)間延長(zhǎng)。T組則表現(xiàn)為不同程度的雙后肢運(yùn)動(dòng)功能障礙，與S組和各個(gè)Rop組相比較具有顯著性差異，(P

5、，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張。所有實(shí)驗(yàn)組給藥后3h即出現(xiàn)細(xì)胞凋亡和凋亡相關(guān)基因的表達(dá)，6h時(shí)明顯增多，7d后已明顯下降。R0.25組、R0.5組、R0.75組的AI值與S組比較，差異沒(méi)有顯著性(P>0．05)：T組AI明顯增高，與S組和各個(gè)Rop組比較，具有顯著性差異(P<0．05)。與S組比較，R0．25組、R0.5組、R0．75組bax、bcl-2的陽(yáng)性細(xì)胞光密度值均無(wú)明顯差異(P>0．05)，T組的陽(yáng)性細(xì)胞光密度值較高，與S組和各個(gè)Rop組比較，