JNK在大鼠利多卡因脊髓神經(jīng)毒性中的作用研究.pdf

1、目的：探討c-Jun氨基末端激酶(c-jun N-terminal kinase，JNK)在大鼠利多卡因脊髓神經(jīng)毒性中的作用。
　　方法：成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠96只，體重240±20g，隨機(jī)分成6組（n=16）:正常大鼠組（Ⅰ組）、假手術(shù)組（Ⅱ組）、JNK抑制劑(SP600125)組（Ⅲ組）、二甲基亞砜(Dimethyl sulfoxide，DMSO)組（Ⅳ組）、10％利多卡因組（V組）、JNK抑制劑+

2、10％利多卡因組（Ⅵ組）。Ⅰ組不做任何處理，Ⅱ～Ⅵ組行鞘內(nèi)置管術(shù)。置管后Ⅱ組不再做任何處理;Ⅲ組和Ⅳ組分別鞘內(nèi)注射SP60012525μg和DMSO20μl;V組給予鞘內(nèi)注射10％利多卡因20μl;Ⅵ組先鞘內(nèi)注射SP60012525μg，30分鐘后鞘內(nèi)注射10％利多卡因20μl。于鞘內(nèi)置管術(shù)前，鞘內(nèi)給藥前，鞘內(nèi)給藥后4h、8h、12h、1d、2d、3d、4d、5d、6d分別測(cè)定大鼠后肢機(jī)械縮足反射閾值(Mechanical paw wi

3、thdrawal threshold，MWT)和熱縮足反射潛伏期(Thermal withdrawal htency, TWL)。子給藥后24h每組隨機(jī)取4只大鼠取脊髓腰膨大標(biāo)本，用Western blot法檢測(cè)磷酸化JNK(p-JNK)及JNK的表達(dá)。各組另取4只大鼠的脊髓腰膨大，用原位末端缺口標(biāo)記（TdT-mediated dUTP Nick-EndLabeling，Tunel）法檢測(cè)脊髓神經(jīng)細(xì)胞凋亡情況。
　　結(jié)果：行為學(xué)變

4、化:與Ⅰ組比較，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組的MWT、TWL差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），V組MWT、TWL在給藥后4h、8h、12h、1d、2d、3d、4d增加，給藥后第5d恢復(fù)到給藥前水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，Ⅵ組MWT、TWL在給藥后4h、8h、12h、1d、2d增加，給藥后第3d恢復(fù)至給藥前水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);與V組比較，Ⅵ組在給藥后4h、8h、12h、1d、2d、3d、4d的MWT、TWL均較低，差異有統(tǒng)

5、計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　蛋白表達(dá)變化:Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ組大鼠脊髓均有p-JNK表達(dá)，三組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。與Ⅰ組比較，Ⅲ組脊髓p-JNK表達(dá)降低，V、Ⅵ組脊髓p-JNK表達(dá)增多，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);與Ⅵ組比較，V組脊髓p-JNK表達(dá)增多，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。各組脊髓JNK的表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　細(xì)胞凋亡:與Ⅰ組比較，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組脊髓神經(jīng)細(xì)胞凋亡情況差異無