生物活性玻璃離子液對(duì)成骨細(xì)胞增殖的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的通過在培養(yǎng)液內(nèi)加入生物活性玻璃離子液，觀察成骨細(xì)胞培養(yǎng)過程中成骨細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征的變化，以了解生物活性玻璃對(duì)成骨細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。方法將生物玻璃晶體溶于DMEM培養(yǎng)液內(nèi)，37'C水浴24小時(shí)過濾除去晶體，測(cè)定其內(nèi)的Na、Ca、P、Si四種離子的濃度變化。以DMEM完全培養(yǎng)液作為對(duì)照組培養(yǎng)液，以加入生物活性玻璃離子液的DMEM完全培養(yǎng)液作為實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)液。取人松質(zhì)骨源性成骨細(xì)胞和乳鼠顱骨源性成骨細(xì)胞，分別用完全DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)，觀察成骨

2、細(xì)胞生長(zhǎng)形態(tài)。取第二代成骨細(xì)胞以對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)液分別培養(yǎng)，觀察成骨細(xì)胞生長(zhǎng)過程中大體形態(tài)差異、細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)(粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、核糖體、線粒體)的差異、細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(MTT比色法)的差異。結(jié)果Si離子的濃度在實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)液內(nèi)是對(duì)照培養(yǎng)液的2612％(p<0．01)，Ca是88．03％(p<0．01)，P是73．23％(p<0．01)，Na的濃度沒有差異(1~0．05)。對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組的大體細(xì)胞形態(tài)學(xué)比較：在培養(yǎng)48小時(shí)后可見到實(shí)驗(yàn)組人成骨細(xì)胞整

3、體體積較大；實(shí)驗(yàn)組成骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)內(nèi)比對(duì)照組有較多的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體和核糖體；細(xì)胞生長(zhǎng)指數(shù)在培養(yǎng)第2天時(shí)即出現(xiàn)明顯的差異(p<0．01)，實(shí)驗(yàn)組成骨細(xì)胞比對(duì)照組的生長(zhǎng)曲線陡峭。結(jié)論生物活性玻璃離子液有促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖的形態(tài)學(xué)特征。 目的通過在培養(yǎng)液內(nèi)加入生物活性玻璃離子液，觀察成骨細(xì)胞生長(zhǎng)周期的變化。方法以DMEM完全培養(yǎng)液作為對(duì)照組培養(yǎng)液，以加入生物活性玻璃離子液的DMEM完全培養(yǎng)液作為實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)液，取第二代人松質(zhì)骨源性成骨

4、細(xì)胞用DMEM完全培養(yǎng)液培養(yǎng)6天，測(cè)定成骨細(xì)胞生長(zhǎng)周期；成骨細(xì)胞分別用兩種培養(yǎng)液培養(yǎng)1-6天，流式細(xì)胞儀測(cè)定每天成骨細(xì)胞Gl、S、G2期的百分比：對(duì)細(xì)胞增殖活性指標(biāo)SPF(S期細(xì)胞比率)和H(增殖指數(shù))進(jìn)行比較。結(jié)果人成骨細(xì)胞生長(zhǎng)周期約4天，細(xì)胞周期的百分比變化情況在1-4天內(nèi)進(jìn)行對(duì)比有意義，實(shí)驗(yàn)組在培養(yǎng)48小時(shí)時(shí)細(xì)胞的SPF比對(duì)照組增加(p

5、生物活性玻璃離子液能改變?nèi)顺晒羌?xì)胞的生長(zhǎng)周期，推測(cè)生物活性玻璃對(duì)人成骨細(xì)胞的周期影響是通過數(shù)種基因的激活，調(diào)控成骨細(xì)胞的G。期縮短，細(xì)胞生長(zhǎng)增快，通過S期快速進(jìn)入了G2M期，細(xì)胞分裂提前，細(xì)胞周期縮短，結(jié)果加速細(xì)胞增殖，促進(jìn)臨床骨修復(fù)。 目的通過成骨細(xì)胞的培養(yǎng)，觀察生物活性玻璃離子液對(duì)成骨細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子的影響，以進(jìn)一步探討生物活性玻璃促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖的可能機(jī)制。方法以DMEM完全培養(yǎng)液作為對(duì)照組培養(yǎng)液，以加入生物活性玻璃離子

6、液的DMEM完全培養(yǎng)液作為實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)液，取第二代人松質(zhì)骨源性成骨細(xì)胞和乳鼠顱骨源性成骨細(xì)胞，以對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)液分別培養(yǎng)4天，收集培養(yǎng)的成骨細(xì)胞抽提RNA，將RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)體外擴(kuò)增DNA，熒光定量檢測(cè)人成骨細(xì)胞表達(dá)的細(xì)胞因子：I型膠原(collagen-I)、骨鈣素(bonegla-protein，BGP)、成骨細(xì)胞特異轉(zhuǎn)錄因子(core-bindingfactoralpha-1，CBFAI)、類胰

7、島素樣生長(zhǎng)因子II(IGF-2)，鼠成骨細(xì)胞2種生長(zhǎng)因子BGP、collagen．I。結(jié)果人成骨細(xì)胞4種生長(zhǎng)因子的表達(dá)量實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組之比為：Collagen-I=1．773、BGP=1．848、CBFAI=2．233、IGF-2=2．106，鼠成骨細(xì)胞2種生長(zhǎng)因子的表達(dá)量實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組之比為：Collagen-I=3．947、BGP=2．687。實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相對(duì)量比較有顯著差異(p<0．05)。結(jié)論生物活性玻璃促進(jìn)成骨細(xì)胞分泌Col

8、lagen．I、BGP，有利于骨基質(zhì)的重建和鈣化：生物活性玻璃促進(jìn)成骨細(xì)胞分泌CBFAI、IGF-2，促進(jìn)成骨細(xì)胞自身的增殖，有利于臨床骨折或骨缺損的修復(fù)。 目的：傳統(tǒng)的自體骨、異種骨、人源凍干骨、同種異體骨、凍干小牛骨等移植物都存在一定的缺點(diǎn)和普遍應(yīng)用的限制，因而尋求人造骨移植替代材料成為研究目標(biāo)。生物活性玻璃是在此研究下的產(chǎn)物之一，深入了解國內(nèi)外研究生物活性玻璃的研究進(jìn)展，以達(dá)到對(duì)此材料的完整認(rèn)識(shí)。 資料來源：應(yīng)用計(jì)

9、算機(jī)檢索OvidOnline系列醫(yī)學(xué)資源(包括OvidCollection、BP、LWW期刊、Medline、BMA)1996-01／2005-08和ElsevierSDOS電子期刊2001-01／2005-01期間的相關(guān)文章，檢索詞為"boneimplant,bioglass,osteoblast,bonerestore",并限定文章語言種類為English。同時(shí)計(jì)算機(jī)檢索萬方數(shù)據(jù)庫2000-01／2005-01期間的相關(guān)文章，檢索詞

10、“生物活性玻璃成骨細(xì)胞骨移植骨修復(fù)”，并限定文章語言種類為中文。資料選擇：對(duì)資料進(jìn)行初選，并查看每篇文獻(xiàn)后的引文。納入標(biāo)準(zhǔn)：文章所述內(nèi)容應(yīng)與生物活性玻璃的研究相關(guān)。排除標(biāo)準(zhǔn)：重復(fù)或Mata分析類文獻(xiàn)。資料提煉：共收集到76篇相關(guān)文獻(xiàn)，40篇文獻(xiàn)符合納入標(biāo)準(zhǔn)，排除的36篇文章為容易陳舊或重復(fù)。 資料綜合：從生物活性玻璃在組織．材料界面反應(yīng)、對(duì)成骨細(xì)胞生長(zhǎng)周期的影響、激活基因等促進(jìn)骨修復(fù)方面進(jìn)行綜述，對(duì)其成份的變化對(duì)活性作用影響、應(yīng)