博寧霉素抗腫瘤和抗人乳頭瘤病毒作用機制的研究.pdf

1、博寧霉素(Boningmycin,BON)是我所許鴻章研究組通過改善發(fā)酵條件從放線菌平陽變種中分離得到的單一結構新化合物,屬于博來霉素族抗生素。本研究在體內外水平評價了博寧霉素抗腫瘤活性并較為深入的研究其抗腫瘤機制,為開發(fā)應用打下理論基礎。體外實驗結果表明博寧霉素對六種不同組織來源的9個人腫瘤細胞系都有很好的生長抑制作用,而且活性均強于目前臨床應用的博來霉素一倍左右。分別選用裸鼠HepG2肝癌模型和小鼠H22肝癌模型進行體內抗腫瘤活性研

2、究,博寧霉素也表現出明顯的抗腫瘤活性,且高于臨床所用的博來霉素陽性對照組。
　　 在博寧霉素抗腫瘤作用機制的研究中,我們發(fā)現博寧霉素為周期特異性藥物,可引起腫瘤細胞G2/M周期阻滯,博寧霉素可引起細胞內ROS水平升高,這一過程需要細胞內鐵離子的參與。高劑量的博寧霉素可誘導腫瘤細胞凋亡,PARP蛋白活化切割p53表達增加,caspase-3,6,7,8,9均被切割活化。低劑量博寧霉素誘導腫瘤細胞衰老,p53表達出現瞬時增加,周期蛋

3、白P21,p27表達上調。采用SiRNA技術降低P21,p27表達量可明顯增加博寧霉素的細胞毒性。因此本研究認為博寧霉素通過誘導細胞衰老和凋亡雙重機制引起腫瘤細胞死亡,體內外實驗表明博寧霉素抗腫瘤活性優(yōu)于目前臨床應用的同類化合物博來霉素,值得進一步的開發(fā)研究。
　　 人乳頭瘤病毒(HPV)是一種嗜上皮性小DNA病毒,為人類多種疣病的病原微生物,近些年來更發(fā)現其與多種惡性腫瘤相關。目前HPV研究的主要障礙是缺乏合適的細胞模型和動物

4、模型,這極大的限制了HPV致病機制的研究和抗HPV藥物的研究開發(fā)。博來霉素族藥物是一類被廣泛應用于HPV感染皮膚治療的藥物,在臨床中治療尖銳濕疣等疾病的療效顯著,但其通過何種機制發(fā)揮作用仍不清楚。
　　 我們的前期研究工作發(fā)現,具有自主知識產權的新抗生素博寧霉素的肺部毒副反應肺纖維化明顯降低,對于治療尖銳濕疣具有良好的療效,因此本研究對博寧霉素抗HPV作用機制進行研究探討。博寧霉素對HPV陽性細胞HeLa具有生長抑制作用,且活性

5、強于目前國內外臨床常用的博來霉素和平陽霉素。博寧霉素可以通過誘導HeLa細胞凋亡和衰老而使受感染的細胞停止增殖,最終走向細胞死亡,細胞解體:高劑量的博寧霉素可誘導HeLa出現染色質凝集,細胞凋亡,PARP蛋白活化切割,同時伴有細胞內p53表達量增加和Caspase3,9的切割活化；低劑量的博寧霉素可誘導HeLa細胞發(fā)生衰老,β-半乳糖苷酶染色細胞呈陽性,與衰老相關p53,p21和p27的表達明顯升高,而目前臨床多用的鬼臼毒素并不能引起細