酶法提取云南蘿芙木中利血平和育亨賓的工藝研究.pdf

1、云南蘿芙木(Rauvolfiayunnanensis Tsiang)是我國的重要藥用植物,含有多種生物堿,如利血平、育亨賓、阿馬尼新等。其中的利血平主要用于治療高血壓。育亨賓具有廣泛的藥理作用,主要被用來治療男性性功能障礙,也可用于治療風濕、動脈硬化等。
　　 纖維素酶和果膠酶能水解植物細胞壁,促進細胞內(nèi)有效成分的溶出,通過對纖維素和果膠的分解能簡化物質(zhì)分離純化的步驟。生物酶降解技術(shù)作為提取和分離天然產(chǎn)物中有效成分的一種新興技術(shù)

2、,被越來越廣泛的應(yīng)用。目前國內(nèi)暫沒有利用酶降解提取利血平和育亨賓的研究報道。
　　 本文在已有的利血平和育亨賓提取工藝的基礎(chǔ)上,進行了纖維素酶和果膠酶降解植物細胞壁提取云南蘿芙木中利血平和育亨賓的實驗研究。
　　 首先研究了高效液相色譜法共同測定云南蘿芙木中利血平和育亨賓的色譜條件。色譜柱為VP-ODS C18。選擇流動相為:流動相A,甲醇；流動相B,0.004mol/L二乙胺；梯度洗脫程序為:0～20min,60％A-

3、40％B；20～40min,A:60％→95％,B:40％→5％；流速:1mL/min；檢測波長278nm；柱溫:30℃。
　　 對比四種提取溶劑:甲醇、95％乙醇、50％乙醇(含0.05mol/L H2SO4)、1％乙酸溶液,比較加酶組和不加酶組利血平和育亨賓提取量。結(jié)果表明:未經(jīng)優(yōu)化條件下,加纖維素酶后利血平提取率分別提高了27.93％、25.05％、25.28％、53.01％；育亨賓分別提高了29.05％、61.19％、3

4、1.15％、81.15％。
　　 纖維素酶和果膠酶解提取利血平和育亨賓的最佳反應(yīng)條件研究:先加酶提后加入1％乙酸繼續(xù)提取,結(jié)果表明:纖維素酶作用的最佳條件為:pH4.5、溫度50℃、時間4h、酶用量1.2mg/g。在纖維素酶作用最佳條件下同時加入1mg/g果膠酶,可有效縮短提取時間,提高提取的效率。確定酶水解條件為pH值4.5、溫度50℃、時間4h、酶用量1.2mg/g,果膠酶1mg/g。與常用的溶劑甲醇、95％乙醇、50％乙醇