中藥方劑(麻芎舒痛方)組方設(shè)計(jì)方法研究.pdf

1、1基于藥效學(xué)基礎(chǔ)的麻芎舒痛方組方依據(jù)和劑量篩選
　　 本文首先對(duì)中藥復(fù)方的組方依據(jù)和劑量篩選進(jìn)行藥效學(xué)研究。以臨床療效為基礎(chǔ),以《中華人民共和國(guó)藥典》為依據(jù),擬定中藥復(fù)方基本藥味和用藥范圍。以鎮(zhèn)痛效應(yīng)為觀(guān)察指標(biāo),通過(guò)正交試驗(yàn),觀(guān)察不同配比和不同劑量的中藥復(fù)方藥物對(duì)3種偏頭痛動(dòng)物模型的藥效影響,篩選出中藥復(fù)方藥味配伍及最佳劑量配比。
　　 1.1治療偏頭痛中藥復(fù)方藥物不同劑量配伍對(duì)硝酸甘油型偏頭痛大鼠行為學(xué)的影響
　

2、　 觀(guān)察不同藥味配伍和不同劑量配比的中藥復(fù)方對(duì)硝酸甘油型偏頭痛大鼠撓頭次數(shù)的影響。結(jié)果顯示麻芎舒痛方(樣本十)對(duì)偏頭痛大鼠的撓頭次數(shù)有最佳抑制作用。與模型對(duì)照組對(duì)比,統(tǒng)計(jì)學(xué)具有顯著性差異(P<0.05)。
　　 1.2治療偏頭痛中藥復(fù)方藥物不同劑量配伍對(duì)熱板法小鼠鎮(zhèn)痛作用的研究
　　 觀(guān)察在熱板法小鼠模型實(shí)驗(yàn)中,不同藥味配伍和不同劑量配比的中藥復(fù)方的鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果顯示(樣本二、樣本八和樣本十)對(duì)小鼠熱板法致痛時(shí)間有明顯

3、的延長(zhǎng)效應(yīng)。與模型對(duì)照組對(duì)比,統(tǒng)計(jì)學(xué)具有顯著性差異(P<0.05)。
　　 1.3治療偏頭痛中藥復(fù)方藥物不同劑量配伍對(duì)2％甲醛所致雙相疼痛鎮(zhèn)痛效應(yīng)影響
　　 觀(guān)察不同藥味配伍和不同劑量配比的中藥復(fù)方的對(duì)2％甲醛所致雙相疼痛鎮(zhèn)痛效應(yīng)的影響。結(jié)果顯示樣本六、樣本七和樣本十對(duì)2％甲醛致痛所產(chǎn)生的Ⅱ相疼痛時(shí)間有明顯延長(zhǎng)效應(yīng)。與模型對(duì)照組對(duì)比,統(tǒng)計(jì)學(xué)具有顯著性差異(P<0.05)。
　　 綜上所述,以3種動(dòng)物模型的綜合藥理

4、效應(yīng)為實(shí)驗(yàn)依據(jù),進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)和方差分析,篩選出包含治療偏頭痛的著名藥對(duì)和經(jīng)典藥隊(duì)的中藥復(fù)方-麻芎舒痛方,為治療偏頭痛的中藥復(fù)方提供了組方依據(jù)和優(yōu)化劑量。
　　 2不同治則配伍的中藥方劑藥效研究
　　 采用硝酸甘油誘發(fā)的實(shí)驗(yàn)性偏頭痛大鼠模型,以與偏頭痛相關(guān)的5-HT作為藥效學(xué)重要指標(biāo)之一,觀(guān)察不同治則組成的中藥復(fù)方對(duì)大鼠腦組織和血清中的多種指標(biāo)的影響,進(jìn)一步確證麻芎舒痛方的藥理作用。
　　 對(duì)正常對(duì)照組、模型組、陽(yáng)性

5、藥對(duì)照組和中藥復(fù)方治則配伍組在偏頭痛大鼠血清中5-HT、CGRP和ET-1的含量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,結(jié)果表明:與模型組相比,天麻、川芎配伍組可以顯著降低偏頭痛大鼠血清中5-HT含量(P<0.05)。麻芎舒通方水提物可以顯著降低偏頭痛大鼠血清中5-HT和ET-1含量(P<0.05)。麻芎舒通方醇提物可以顯著降低偏頭痛大鼠血清中CGRP、ET-1和5-HT含量(P<0.05)。
　　 對(duì)正常對(duì)照組、模型組、陽(yáng)性藥對(duì)照組和中藥復(fù)方治則配伍組

6、在偏頭痛大鼠腦組織中5-HT含量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,結(jié)果表明:與模型對(duì)照組相比,天麻川芎配伍組、麻芎舒通方水提物和麻芎舒通方醇提物均可以顯著降低偏頭痛大鼠腦組織中在5-HT含量(P<0.05)。
　　 對(duì)不同治則配伍的中藥方劑進(jìn)行藥效研究,結(jié)果顯示:以平肝降火、活血行氣、散通絡(luò)止痛為治則的麻芎舒通方藥效優(yōu)于天麻、川芎配伍組。不同的提取工藝具有不同的藥理效應(yīng),麻芎舒通方乙醇提取優(yōu)于水煎提取。
　　 3中藥復(fù)方(麻芎舒痛方)的藥學(xué)

7、研究
　　 如何正確地評(píng)價(jià)中藥制備工藝的合理與優(yōu)劣,是目前困擾中藥研究的問(wèn)題之一。中藥復(fù)方藥學(xué)研究是中藥復(fù)方研究的基礎(chǔ),盡可能地將發(fā)揮藥效和發(fā)揮療效的物質(zhì)基礎(chǔ)提取出來(lái),才能更好地運(yùn)用于臨床,服務(wù)于患者。最佳制備工藝研究是中藥復(fù)方藥學(xué)研究的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。
　　 3.1川芎不同提取部位治療偏頭痛的藥效學(xué)研究
　　 本文在比較關(guān)鍵的藥物或不好確定藥物提取路線(xiàn)時(shí),以藥效學(xué)試驗(yàn)為依據(jù),對(duì)川芎多種提取物進(jìn)行比較,將中藥化學(xué)-藥理

8、效應(yīng)相結(jié)合,并采用HPLC-ECD技術(shù)測(cè)定偏頭痛大鼠血液和腦組織中的5-HT含量,最終確定川芎乙醇提??；通過(guò)對(duì)其余四味藥物化學(xué)成分和藥理成果的分析,確定四味藥物醇提。
　　 3.2中藥復(fù)方提取路線(xiàn)和提取方式的確定
　　 以君臣藥物的有效成分為指標(biāo),對(duì)復(fù)方的混合提取方式和單獨(dú)提取方式進(jìn)行考察,天麻素混和提取/單獨(dú)提取的比值是102.42％,葛根素混和提取/單獨(dú)提取的比值是108.54％,說(shuō)明混合提取更有利于天麻和葛根中有效

9、成分的提取。阿魏酸混和提取/單獨(dú)提取的比值是99.46％,說(shuō)明對(duì)于阿魏酸來(lái)說(shuō),混合提取和單獨(dú)提取基本相當(dāng)。從大生產(chǎn)和成本考慮,川芎亦選擇混合提取方式。
　　 3.3麻芎舒痛方的制備工藝研究
　　 以L(fǎng)9(34)正交試驗(yàn)進(jìn)行最佳工藝條件的篩選和驗(yàn)證,確定了復(fù)方的最佳制備工藝,即五味藥物以8倍量60％的乙醇提取3次,每次2小時(shí)。此工藝在保證君藥有效成分提取的同時(shí),兼顧了兩味臣藥有效成分的提取。五味藥物同時(shí)提取,具有成本降低、

10、工藝簡(jiǎn)單有效之優(yōu)點(diǎn),有利于大生產(chǎn)。
　　 4中藥復(fù)方(麻芎舒痛方)的制劑質(zhì)量控制
　　 4.1儀器與試藥
　　 高效液相色譜儀:Waters600泵,Waters996檢測(cè)器,Waters717自動(dòng)進(jìn)樣器,Millennium32 Login工作站；薄層掃描儀,型號(hào):TRANSILLUMINATOR2020D；空氣壓縮泵,TOSHIBA Corporation生產(chǎn)；阿魏酸、天麻素、葛根素、川芎對(duì)照藥材和白芷對(duì)照藥

11、材為對(duì)照品或?qū)φ账幉摹?br>　　 4.2 TLC色譜鑒別
　　 照中國(guó)藥典薄層色譜法(附錄ⅥB)試驗(yàn),對(duì)川芎、天麻和葛根進(jìn)行TLC定性鑒別。川芎的薄層色譜鑒別采用川芎對(duì)照藥材,以正已烷-醋酸乙酯(9:1)為展開(kāi)劑,供試品色譜中,在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；葛根的薄層色譜鑒別采用葛根素對(duì)照品,以氯仿-甲醇-水(7:2.5:0.25)為展開(kāi)劑,供試品色譜中,在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)

12、；白芷的薄層鑒別采用白芷對(duì)照藥材,以石油醚(60-90℃)-乙醚(1:1)為展開(kāi)劑,。供試品色譜中,在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。陰性對(duì)照均無(wú)干擾。
　　 4.3含量測(cè)定
　　 4.3.1樣品中阿魏酸的含量測(cè)定
　　 色譜柱:SymmetryC18(3.9×150 mm,5μm)；流動(dòng)相A:乙腈-0.05％醋酸水溶液,流動(dòng)相B:甲醇。0～45 min,A由100％至60％,B由0％至40％,4