白藜蘆醇對(duì)實(shí)驗(yàn)性免骨關(guān)節(jié)炎軟骨IL-1β、iNOS蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、目的:評(píng)價(jià)白藜蘆醇對(duì)實(shí)驗(yàn)性兔骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞產(chǎn)生IL-1β、iNOS蛋白的影響,闡明白藜蘆醇治療骨關(guān)節(jié)炎的可能機(jī)制。
　　 方法:36只新西蘭大白兔,6-8個(gè)月齡,雌雄各半,體重1.5-2.5kg,隨機(jī)留下6只(雌雄各3只),以作為健康對(duì)照組(A組),余下30只均以Hulth法復(fù)制膝模型。無(wú)菌條件下取右膝關(guān)節(jié)內(nèi)側(cè)縱切口長(zhǎng)約2cm,顯露膝關(guān)節(jié),然后切斷前交叉韌帶、內(nèi)側(cè)副韌帶,完整切除內(nèi)側(cè)半月板,術(shù)中注意保護(hù)軟骨面不受損傷,術(shù)后關(guān)節(jié)

2、不固定,允許自由活動(dòng)。術(shù)后8周隨機(jī)抽樣選取6只行X線和病理學(xué)檢查證實(shí)造模成功。余下24只大白兔,隨機(jī)分為4組:模型對(duì)照組(B組)、白藜蘆醇高(C組)、中(D組)、低(E組)劑量組。術(shù)后第8周開始每日清晨,A、B組以5ml含0.1％二甲基亞砜的蒸餾水灌胃;白藜蘆醇各組每天以相應(yīng)劑量白藜蘆醇溶液(濃度為60mg/ml)C組每日劑量為120mg/kg/D組每日劑量為60mg/kg/d,E組每日劑量為30mg/kg/d灌胃,連續(xù)六周。第14周處

3、死大白兔,取右膝關(guān)節(jié)股骨內(nèi)踝內(nèi)側(cè)軟骨組織,置于液氮低溫保存，以備檢測(cè)蛋白和病理形態(tài)學(xué)觀察檢查。應(yīng)用Western-blot法檢測(cè)IL-1β、iNOS蛋白濃度。HE染色光鏡下觀察組織形態(tài)學(xué),按Mankin'S評(píng)分方法對(duì)關(guān)節(jié)軟骨病理改變進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)評(píng)分。所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　 結(jié)果:①與A組(正常組)相比,B組(模型對(duì)照組)關(guān)節(jié)軟骨組織HE染色光鏡下呈明顯退行性變,Mankin's評(píng)分(7.7

4、2 vs0.00)顯著增高;C組、D組、E組(白藜蘆醇高、中、低劑量干預(yù)組)與B組Mankin's評(píng)分(2.42、2.63、3.13 vs7.72),評(píng)分降低,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05).
　　 ②在A組、B組、C組、D組、E組的軟骨組織中都有IL-1β、iNOS蛋白表達(dá);模型對(duì)照組與健康組比,B組IL-1β、iNOS蛋白濃度分別增高60.4％與84.7％,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　 ③白藜蘆醇高、中、低劑量

5、干預(yù)組與模型對(duì)照組比較,軟骨組織中IL-1β蛋白濃度下降23.5％、24.7％、20.3％,iNOS濃度下降19.8％、20.0％、10.6％,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);高、中、低劑量組與A組相比較,IL-1β蛋白濃度升高22.7％、20.8％、28.0％,iNOS濃度升高48.1％、47.8％、65.2％,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　 ④白藜蘆醇高、中劑量相比較沒有明顯差異(p＞0.05),高中劑量與低劑量組相比較