貫葉金絲桃素的分離純化研究.pdf

1、本文對貫葉金絲桃素的定性定量分析方法和提取純化方法進(jìn)行了研究.本文主要研究內(nèi)容如下:1)建立了一個新的貫葉金絲桃素的高效薄層色譜和薄層色譜定性分析方法,為國內(nèi)首次報道.薄層色譜的最佳條件為:以薄層層析硅膠GF254為固定相,以正己烷-乙酸乙酯(5:1,v/v)為展開劑,貫葉金絲桃素的R<,f>值為0.41.2)建立了一個新的貫葉金絲桃素的反相高效液相色譜定量分析方法.高效液相色譜的分析條件為:固定相為Alltima C<,18>柱:A溶

2、液:80﹪甲醇+1﹪乙酸,B溶液:甲醇,采用梯度洗脫:0min~10min,0﹪B~100﹪B;10min~40min,100﹪B;流速為1mL/min;柱溫為30℃;檢測器為UV檢測器(270nm).貫葉金絲桃素可達(dá)到基線分離的要求,它的保留時間為14.0min.線性方程為:M=10.3238 A-0.01332,相關(guān)系數(shù)r=0.9993,線性范圍0.5-10μg,精密度RSD=1.14﹪,平均回收率為98.34﹪,當(dāng)信噪比為3:1時

3、,最小檢測限為7.34×10<'-7>μg.3)進(jìn)行了貫葉金絲桃素的提取和粗分離方法的研究.采用超聲波強(qiáng)化提取的方法.采用薄層制備色譜對貫葉連翹粗提物中的貫葉金絲桃素進(jìn)行純化.最佳制備薄層色譜條件為:固定相為薄層層析硅膠GF254,展開劑為正己烷-乙酸乙酯(4.5:1,v/v),純化后貫葉金絲桃素樣品的純度為76.64﹪.進(jìn)行了用常壓硅膠柱層析技術(shù)分離制備貫葉金絲桃素的研究,優(yōu)化了分離條件,以柱層析硅膠為固定相,以正己烷-乙酸乙酯(6:

4、1,v/v)為流動相進(jìn)行洗脫,分步收集,合并相同組分.得到的貫葉金絲桃素樣品的純度為61.14﹪.4)首次采用干柱層析對貫葉連翹粗提物中的貫葉金絲桃素進(jìn)行純化,該方法國內(nèi)外尚未見報道.固定相為薄層層析硅膠GF254,流動相為正己烷-乙酸乙酯(4.5:1,v/v).純化后的貫葉金絲桃素樣品的純度為72.13﹪.5)使用制備薄層色譜法和加壓型制備液相色譜聯(lián)用的方法制備高純度貫葉金絲桃素樣品.其純度大于98﹪.6)采用ESI-MS對樣品進(jìn)行分