蒙古黃芪中皂苷類成分提取工藝及其體外代謝的初步研究.pdf

1、蒙古黃芪(Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao)為我省道地藥材，是重要益氣藥?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究證實(shí)，黃芪具有抗病毒感染、保護(hù)心臟及腎臟、雙向調(diào)節(jié)血糖、抗缺氧、抗自由基氧化、抗衰老、抗腫瘤、增強(qiáng)免疫力、對(duì)中樞神經(jīng)的雙向調(diào)節(jié)作用、利尿、降壓等功效。黃芪主要含有黃芪苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、V等多種皂苷，毛蕊異黃酮、槲皮素、異黃烷、芒柄花素等黃酮類成分還有黃芪多糖Ⅰ等

2、多糖成分，及多種氨基酸和微量元素。高效液相色譜(High-Performance Liquid Chromatography，HPLC)具有靈敏、快捷、重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)，已經(jīng)被越來越廣泛的應(yīng)用于中藥的質(zhì)量控制等方面。目前HPLC中由于紫外檢測(cè)器其高靈敏度和穩(wěn)定性，在高效液相色譜中應(yīng)用最廣泛。但它只適用于能夠吸收紫外和可見光的物質(zhì)。由于許多物質(zhì)并不含特征紫外吸收基團(tuán)，沒有紫外或可見光吸收，或紫外-可見光吸收弱，例如皂苷類、糖類、萜類、甾體類

3、、氨基酸類和脂肪酸類等化合物沒有紫外吸收或者僅有末端吸收，無法或很難采用HPLC-UV檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)。蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(evaporative light-scattering detector,ELSD)給高效液相色譜的檢測(cè)技術(shù)帶來了活力，這種檢測(cè)器的主要特點(diǎn)是：可以測(cè)定許多沒有紫外-可見光吸收的物質(zhì)，適用于梯度洗脫，對(duì)溫度的要求不苛刻，且比示差折光檢測(cè)器靈敏度高，不依賴樣品的光學(xué)性質(zhì)，比紫外檢測(cè)器更適合此類中藥的分析及質(zhì)量控制。本文

4、主要以HPLC-ELSD為分析手段，對(duì)山西道地藥材黃芪中皂苷類成分提取工藝及其體外代謝進(jìn)行了初步研究。
　　 ⑴山西道地藥材蒙古黃芪中黃芪甲苷含量測(cè)定方法研究。采用高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測(cè)(HPLC-ELSD)法建立測(cè)定山西道地藥材蒙古黃芪中黃芪甲苷含量的方法。流動(dòng)相為乙腈-水，梯度洗脫，柱溫：25C；進(jìn)樣量：20μL；流速：1mL/min，ELSD檢測(cè)器漂移管溫度：60C，氣流速：2.0L/min，增益：8。系統(tǒng)性試驗(yàn)中，

5、色譜柱理論塔板數(shù)按黃芪甲苷計(jì)算為127001，分離度為2.25，拖尾因子為1.02，表明對(duì)稱性良好，保留時(shí)間為35.58 min。通過對(duì)方法的線性、精密度、回收率、穩(wěn)定性等的考察，結(jié)果表明：黃芪甲苷在7.5～750μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好R2=0.9972，日內(nèi)、日間精密度均良好，平均回收率在98.0％～102.0％之間，穩(wěn)定性良好，該方法操作簡(jiǎn)便，采用梯度洗脫分離度好，操作簡(jiǎn)便，適用于山西道地藥材蒙古黃芪中黃芪甲苷的研究。

6、　　 ⑵蒙古黃芪中皂苷類成分提取工藝的優(yōu)化。優(yōu)選黃芪中黃芪甲苷的醇-氨提取工藝，以黃芪甲苷的含量為指標(biāo)，采用L9(34)正交試驗(yàn)篩選黃芪的最佳提取工藝條件。優(yōu)化的提取工藝為甲醇：氨水為9∶1，溶劑總量150mL，超聲40min，提取3次。
　　 ⑶蒙古黃芪中皂苷類成分在大鼠肝微粒體體外代謝研究。本實(shí)驗(yàn)采用高效液相-蒸發(fā)光散射檢測(cè)器為檢測(cè)于段，對(duì)黃芪中皂苷類提取物的大鼠肝微粒體體外代謝進(jìn)行了初步的研究，對(duì)于科學(xué)認(rèn)識(shí)中藥的安全性、