苦瓜莖葉中皂苷的提取分離及其體外活性研究.pdf

1、苦瓜(Momordica charantia L.，MC)作為一種藥食兩用植物，近些年來對(duì)于其研究越來越深入?？喙现泻性碥?、甾類、蛋白質(zhì)多肽、生物堿、多糖、黃酮、有機(jī)酸、微量元素、氨基酸、維生素等多種化學(xué)活性成分，并具有降血糖、抗病毒、抗腫瘤、抗氧化、抗菌、抗生育、抗炎、免疫調(diào)節(jié)及降壓等藥理作用，引起國內(nèi)外學(xué)者的高度重視。但對(duì)苦瓜莖葉的化學(xué)活性成分和藥理作用研究較少，其當(dāng)中含有豐富的皂苷類物質(zhì)，并且藥理活性顯著，具有極高的開發(fā)利用價(jià)值

2、。
　　本文從苦瓜莖葉當(dāng)中提取分離皂苷，并以體外抗氧化、HepG2細(xì)胞、α-葡萄糖苷酶為模型，探討以抗氧化活性為基礎(chǔ)，苦瓜莖葉皂苷對(duì)抗癌活性和降糖活性的影響。主要內(nèi)容有:
　　(1)苦瓜莖葉皂苷的提取分離研究
　　本研究以苦瓜莖葉為材料，將苦瓜莖葉70％乙醇提取物用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得到四個(gè)不同的組分。然后采用AB-8型大孔吸附樹脂對(duì)正丁醇部位進(jìn)行純化。通過測定各個(gè)組分皂苷的含量，結(jié)果，經(jīng)過大孔樹脂純化后皂

3、苷的含量最高，為84.38 mg/g。將大孔吸附樹脂70％洗脫成分經(jīng)硅膠柱層析和半制備高效液相色譜柱層析進(jìn)一步分離，得到兩個(gè)化合物，經(jīng)1H-NMR和13C-NMR進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，確定其為Momordicoside L和MomordicineⅣ。
　　(2)苦瓜莖葉皂苷體外抗氧化和細(xì)胞毒性研究
　　研究苦瓜皂苷對(duì)DPPH自由基和ABTS+自由基的清除能力，其清除率的大小代表抗氧化能力的大小。結(jié)果顯示，在對(duì)DPPH自由基清除率實(shí)驗(yàn)

4、中抗氧化能力:Vc＞正丁醇相＞乙酸乙酯相＞石油醚相＞醇提＞大孔吸附樹脂相＞Momordicoside L＞MomordicineⅣ。ABTS+自由基清除實(shí)驗(yàn)中抗氧化能力:Vc＞正丁醇相＞乙酸乙酯相＞大孔吸附樹脂相＞石油醚相＞ MomordicineⅣ＞醇提＞Momordicoside L。總的來說，正丁醇組分相較其它組分的抗氧化能力較強(qiáng)，而分離的單體Momordicoside L和MomordicineⅣ對(duì)這兩種自由基幾乎沒有抑制作用，

5、表明抗氧化能力很弱。用MTT法以HepG2癌細(xì)胞為模型，研究皂苷的抑制癌細(xì)胞增殖作用。正丁醇相和大孔吸附樹脂相IC50分別為386.63和303.22μg/mL，Momordicoside L和MomordicineⅣ的IC50值分別為6.60和10.26μg/mL，分離得到的單體對(duì)HepG2細(xì)胞抑制率明顯大于總皂苷。
　　(3)苦瓜莖葉皂苷抑制α-葡萄糖苷酶研究
　　以α-葡萄糖苷酶為模型，研究苦瓜莖葉皂苷對(duì)其抑制作用以及

6、通過Lineweaver-Burk作圖判斷抑制劑對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制類型。結(jié)果表明，在0～800μg/mL濃度范圍內(nèi)，Momordicoside L和MomordicineⅣ對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制效果明顯高于其它組分，當(dāng)抑制劑濃度在800μg/mL時(shí)，Momordicoside L的抑制效果強(qiáng)于陽性對(duì)照阿卡波糖，而MomordicineⅣ與阿卡波糖抑制α-葡萄糖苷酶活性效果相當(dāng)。通過酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)，顯示Momordicoside