七葉皂苷鈉的抗腫瘤活性及其作用機制.pdf

1、七葉皂苷為五環(huán)三萜皂苷，屬于非甾體類抗炎藥，其鈉鹽七葉皂苷鈉廣泛應(yīng)用于臨床，具有抗?jié)B出及增加靜脈張力、消腫、抗炎和改善血液循環(huán)的作用。近年來，非甾體類抗炎藥物的抗腫瘤作用備受關(guān)注，但是有關(guān)七葉皂苷鈉抗腫瘤活性的相關(guān)研究較少。本文以人癌細(xì)胞和荷瘤昆明白小鼠為模型，對七葉皂苷鈉的體內(nèi)外抗腫瘤活性進行研究，探討了其作用與時間、劑量的關(guān)系及其與化療藥物聯(lián)用時的協(xié)同作用，并運用細(xì)胞生物學(xué)、生物化學(xué)和分子生物學(xué)等方法對其抗腫瘤作用機制進行研究，為七

2、葉皂苷鈉在腫瘤治療的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。本研究要點如下：
　　 1、對人癌細(xì)胞的增殖抑制作用
　　 考察了七葉皂苷鈉對人肝癌細(xì)胞株SMMC7721和HepG2、人宮頸癌細(xì)胞株Hela、人肺腺癌細(xì)胞株A549、人早幼粒急性白血病細(xì)胞系HL-60、人喉鱗狀細(xì)胞癌Hep-2、人胃癌細(xì)胞SGC-7901及BGC-823增殖的影響。結(jié)果表明，七葉皂苷鈉能顯著抑制8種腫瘤細(xì)胞的生長，其IC50分布在37.33～50.24μg/mL

3、之間，且這種抑制作用呈現(xiàn)劑量和時間依賴性；當(dāng)七葉皂苷鈉分別與順鉑、阿霉素和絲裂霉素聯(lián)合應(yīng)用時，對SMMC-7721和HepG的增殖抑制作用顯著增強，其中對較低濃度的化療藥物的協(xié)同作用最為顯著。
　　 2、對荷瘤昆明白小鼠的抑癌效果
　　 在實體瘤模型中，腹腔注射2.8 mg/kg和1.4 mg/kg劑量的七葉皂苷鈉對小鼠H22肝癌、S180肉瘤和U(14)宮頸癌的增長均具有顯著的抑制作用；在腹水瘤模型中，除0.7 mg/

4、kg劑量組對S180腹水癌的作用無統(tǒng)計學(xué)意義外，其余治療組對3種腹水瘤的增長均具有較強的抑制作用，能夠顯著延長腹水瘤小鼠的生存期。當(dāng)以1.4 mg/kg和2.8mg/kg的七葉皂苷鈉與2 mg/kg阿霉素聯(lián)用時，對H22實體瘤的抑瘤率分別高達47.9％和55.3％，對荷H22腹水瘤小鼠的生命延長率分別達到50.0％和54.2％，兩種腫瘤模型中藥物相互作用均為協(xié)同；0.7 mg/kg的七葉皂苷鈉與2 mg/kg阿霉素聯(lián)用時，對實體瘤的抑瘤

5、率為27.7％，對荷腹水瘤小鼠的生命延長率為33.3％，藥物相互作用均為相加。七葉皂苷鈉對荷瘤小鼠免疫指標(biāo)無明顯影響，說明不是通過提高機體免疫力來發(fā)揮抗腫瘤作用。
　　 3、抗腫瘤作用機制
　　 (1)阻滯細(xì)胞周期。七葉皂苷鈉可使HepG2細(xì)胞周期發(fā)生Gi/S期停滯，且對細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)作用呈劑量依賴性。七葉皂苷鈉通過下調(diào)Cyclins E、Cdk2的表達，使細(xì)胞內(nèi)CyclinE-Cdk2復(fù)合物濃度降低，從而阻礙Rb蛋白的

6、磷酸化，引起去磷酸化的Rb蛋白水平的升高及pRb水平的相應(yīng)降低。去磷酸化的Rb蛋白與E2F蛋白結(jié)合，降低了細(xì)胞內(nèi)游離E2F的水平，使得E2F激活S期基因表達的能力下降，導(dǎo)致大量細(xì)胞停滯于G1期。
　　 (2)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。七葉皂苷鈉可誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞發(fā)生PARP-1/AIF介導(dǎo)的Caspase非依賴性凋亡，導(dǎo)致染色質(zhì)凝集、DNA斷裂為約50 kb的大片段。PARP-1在七葉皂苷鈉處理的細(xì)胞中不發(fā)生斷裂，而是保持活性以影響線粒體

7、膜通透性，從而導(dǎo)致HepG2細(xì)胞內(nèi)AIF、Cyt C從線粒體釋放到細(xì)胞漿再轉(zhuǎn)位到細(xì)胞核，同時，Bax/Bcl-2表達比例升高促進了CytC的釋放。AIF直接作用于細(xì)胞核，使得染色質(zhì)受損并產(chǎn)生約50 kb的DNA大片段。該過程并不伴隨著Caspase的激活，證明七葉皂苷鈉誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡的途徑為Caspase非依賴性。
　　 (3)對較低濃度化療藥物的協(xié)同作用。5μg/mL或10μg/mL的七葉皂苷鈉與較低濃度順鉑、阿霉素和