藠頭皂苷的分離純化及其活性研究.pdf

1、蕌頭(Allium chinense G.Don)俗稱“蕎頭”，是一種傳統(tǒng)的藥食兩用資源，原產(chǎn)于中國，具有悠久的種植歷史，在古代中國的文獻(xiàn)中就有記載。蕌頭性味辛，作為一種2000多年歷史的傳統(tǒng)中藥材，具有溫中通陽，理氣寬胸，還陽散結(jié)之功效。本文主要研究了蕌頭皂苷的提取、分離純化工藝，并對蕌頭皂苷的生理活性進(jìn)行了探索。
　　 在單因素的基礎(chǔ)上，利用響應(yīng)曲面法優(yōu)化了蕌頭皂苷的提取工藝，并比較了兩種不同提取方法對蕌頭皂苷得率的影響。結(jié)

2、果表明，超聲輔助提取法具有較高的皂苷得率，經(jīng)過優(yōu)化后最佳提取工藝為:提取時間40min，料液比1∶16，乙醇濃度71％，溫度55℃，蕌頭總皂苷得率為3.71％。
　　 本文比較了幾種不同樹脂對蕌頭皂苷的分離純化效果，篩選出D101大孔樹脂作為分離蕌頭皂苷的樹脂，并優(yōu)化了D101大孔樹脂的分離條件，即將蕌頭皂苷提取液上D101大孔樹脂，吸附2.5h，分別以蒸餾水和5％的乙醇洗脫至流出液無色，蒽酮-硫酸顯色無色，然后以5倍樹脂體積的

3、70％乙醇進(jìn)行洗脫，收集70％的乙醇洗脫液，濃縮后真空干燥，得到較純的蕌頭皂苷干燥樣品。純化后蕌頭皂苷的純度為63.06％，表明D101大孔樹脂具有較好的分離純化效果。定性試驗研究表明，蕌頭皂苷中皂苷類型主要為甾體皂苷。
　　 實驗研究了蕌頭皂苷的抗氧化活性，結(jié)果表明蕌頭皂苷的總還原力較強;對羥自由基清除試驗中，蕌頭皂苷表現(xiàn)出一定的清除能力，但清除效果較弱;蕌頭皂苷展現(xiàn)出良好的DPPH自由基清除能力，當(dāng)濃度為2mg/mL時清除率

4、達(dá)到94.8％。蕌頭皂苷對超氧陰離子自由基具有一定的清除作用，但效果較不顯著，低于陽性對照Vc。
　　 本文研究了蕌頭皂苷體外抑制α-葡萄糖苷酶活性，通過與陽性對照阿卡波糖進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，蕌頭皂苷具有較好的抑制活性。蕌頭皂苷的抑制活性與濃度具有相關(guān)性，抑制率最高為50.2％;堿性條件下蕌頭皂苷抑制活性較高;經(jīng)過Lineweaver-Burk的雙倒數(shù)作圖法，可以看出蕌頭皂苷抑制α-葡萄糖苷酶活性的作用機制是競爭性與酶結(jié)合，與陽性對照

5、阿卡波糖作用機制相同。
　　 實驗還進(jìn)行了蕌頭皂苷在體外清除亞硝酸鹽及阻斷亞硝胺合成的研究，結(jié)果表明在模擬胃液中蕌頭皂苷具有較強的清除亞硝酸鹽以及阻斷亞硝胺合成的能力。模擬胃液環(huán)境下，亞硝酸鹽清除率最高達(dá)99.2％;亞硝胺合成阻斷實驗中最大阻斷率達(dá)到97.4％。本文還探討了非模擬胃液條件下蕌頭皂苷清除亞硝酸鹽以及阻斷亞硝胺合成的能力，結(jié)果表明pH對實驗結(jié)果影響最大，pH為1.3時的清除率最高，清除率達(dá)到98.3％;在pH為1.3