人參皂苷Rb-,1-水解酶的分離純化及其性質(zhì)的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該實驗選定SE酶作為分離純化的對象,通過篩選、分離和純化Rb<,1>水解酶,為研究糖苷酶水解功能和性質(zhì)奠定基礎(chǔ).本論文從糖苷酶的檢測手段入手,以原酶為對象對比了定性和定量的糖苷酶活性檢測手段,在定量方法中比較了以人工底物ρNPG等和天然底物人參皂苷Rb<,1>為酶解對象的作用條件,結(jié)果顯示:1、定性主要采用聚丙酰胺凝膠電泳,SE原酶上樣量在7~10μg左右為適;2、在進行糖苷酶分離純化過程中,人工底物ρNPG水解產(chǎn)生的ρ-Nitroph

2、enol、人參皂苷Rb<,1>水解生成的Rd可分別作為酶活性的檢測和監(jiān)測的對象;3、以ρNPG為底物時,其產(chǎn)物ρ-Nitrophenol檢測范圍是0.0067~0.04mM,水解時間30min,水解溫度為37℃;最適ρH值為5.2;4、以Rb<,1>為底物時,其產(chǎn)物Rd檢測范圍是55.75μg/ml~1.784mg/ml;水解時間6min;反應(yīng)溫度40℃,ρH為4.5.該實驗從SE中分離純化出一種新型、高效水解人參皂苷Rb<,1>的β—

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