大豆糖蜜中皂苷的提取純化及生物活性的研究.pdf

1、大豆糖蜜是醇法大豆?jié)饪s蛋白生產(chǎn)過(guò)程中的副產(chǎn)物，是伴隨著大豆?jié)饪s蛋白的發(fā)展而發(fā)展起來(lái)的。1946年，Smiley和Smith報(bào)道稱，用乙醇來(lái)提取大豆蛋白的過(guò)程中，會(huì)產(chǎn)生一種棕色粘稠的漿狀物質(zhì)。1963年，DanielChajuss將其命名為“大豆糖蜜”，以區(qū)別于生產(chǎn)大豆分離蛋白過(guò)程中產(chǎn)生的大豆乳清液。大豆糖蜜中含有低聚糖、異黃酮、皂苷等生物活性物質(zhì)。本文在國(guó)內(nèi)首次以大豆糖蜜為原料進(jìn)行提取、純化大豆皂苷的研究，并對(duì)由實(shí)驗(yàn)室得到的大豆皂苷樣品

2、進(jìn)行了抗氧化活性的測(cè)定。 ⑴回流加熱溶劑浸提法提取大豆皂苷的最佳工藝條件為：乙醇濃度80％、浸提溫度60℃、浸提時(shí)間7h、料液比1:8，浸提物中大豆皂苷的得率為1.58mg·g-1。超聲輔助溶劑浸提法的最佳工藝條件為：乙醇濃度80％、浸提溫度60℃、超聲時(shí)間40min、料液比1:8，超聲功率350W，超聲頻率40kHz，提取物中大豆皂苷的得率為1.87mg·g-1。超聲輔助溶劑浸提法與傳統(tǒng)的回流加熱溶劑浸提法相比較，超聲輔助溶劑

3、浸提法不但大大縮短了浸提的時(shí)間，同時(shí)也提高了大豆皂苷的得率。 ⑵丙酮萃取法純化大豆皂苷的最佳工藝條件為：液固比50:1、萃取時(shí)間3h、萃取溫度65℃。將丙酮萃取后的殘余物真空干燥，得到純度為36.1％的大豆皂苷樣品。 ⑶采用柱層析分離的方法對(duì)得到的大豆皂苷樣品做了進(jìn)一步的純化試驗(yàn)。利用靜態(tài)吸附試驗(yàn)分別考察了AB-8、D-130、DA-201、HPD-100、HPD-300等不同型號(hào)的樹脂對(duì)大豆皂苷樣液的分離純化效果，優(yōu)選

4、出HPD-300樹脂為層析吸附劑。通過(guò)HPD-300樹脂吸附等溫線的試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)樹脂對(duì)大豆皂苷的吸附量隨溫度的升高而減小，室溫20℃時(shí)樹脂的飽和吸附量最大。大孔吸附樹脂柱層析法純化大豆皂苷試驗(yàn)時(shí)，上樣濃度10mg·mL-1，單位體積樹脂的樣品用量(上樣量)18mg·mL-1，上樣溫度為室溫20℃，采用梯度濃度的乙醇溶液為洗脫劑，以2BV·h-1的流速，柱溫為60℃的條件下對(duì)樹脂柱進(jìn)行洗脫。先用蒸餾水洗去少量可溶性蛋白和糖類，再依次使用20