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文檔簡介
1、目的:通過觀察人子宮內(nèi)膜異位癥在位子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞(endometrial stroma cell,ESC)β-catenin的表達(dá)及利用siRNA(small interfering RNA,siRNA)靶向沉默β-catenin基因以阻斷Wnt/β-catenin信號通路來觀察靶基因血管內(nèi)皮生長因子(vascularendothelial growth factor,VEGF)和基質(zhì)金屬蛋白酶-9(matriXmetalloprot
2、einase-9,MMP-9)表達(dá)的變化,探討Wnt/β-catenin信號通路在子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生機(jī)制中的作用。
方法:采用隨機(jī)、對照設(shè)計(jì),將體外分離、培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜異位癥在位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞24例分成3組(n=8):空白組、陰性熒光組(以含陰性熒光siRNA 100pmol和脂質(zhì)體lip2000 5μl的混合物轉(zhuǎn)染)以及siRNA干擾組(以含β-catenin siRNA 100pmol和脂質(zhì)體lip2000 5μl的混合
3、物轉(zhuǎn)染),并以非子宮內(nèi)膜異位癥子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞10例作為正常對照組。利用Real time RT-PCR和western blot方法分別檢測子宮內(nèi)膜異位癥在位內(nèi)膜空白組和非子宮內(nèi)膜異位癥正常對照組β-catenin的表達(dá)。轉(zhuǎn)染24h后,用以上方法分別檢測子宮內(nèi)膜異位癥空白組、陰性熒光組和siRNA干擾組β-catenin、VEGF以及MMP-9的表達(dá)。
結(jié)果:子宮內(nèi)膜異位癥空白組β-catenin mRNA和蛋白的表達(dá)明
4、顯高于非子宮內(nèi)膜異位癥正常對照組(P<0.05)。子宮內(nèi)膜異位癥siRNA干擾組β-catenin、VEGF以及MMP-9 mRNA和蛋白的表達(dá)明顯低于空白組和陰性熒光組(P<0.05),而空白組與陰性熒光組之間無顯著差異(P>0.05)。
結(jié)論:子宮內(nèi)膜異位癥在位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞β-catenin的表達(dá)明顯高于非子宮內(nèi)膜異位癥患者,阻斷Wnt/β-catenin信號通路后,其靶基因VEGF、MMP-9的表達(dá)明顯受到抑制。因此
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