神經細胞粘附分子介導膠質細胞源性神經營養(yǎng)因子在大鼠坐骨神經慢性壓榨損傷中的作用.pdf

1、目的:本研究采用大鼠坐骨神經慢性壓榨損傷(CCI)的神經病理性疼痛(NP)模型,觀察大鼠背根神經節(jié)(DRG)膠質細胞源性神經營養(yǎng)因子(GDNF)和神經細胞粘附分子(NCAM)表達的變化,以及鞘內注射NCAM相似肽(c3d)、NCAM反義寡核甘酸(Anti-NCAM)對NP的影響,旨在探討GDNF在NP中的作用及可能機制,為在基因水平上防治NP提供實驗依據。
　　 方法:實驗1:成年雄性SD大鼠42只,隨機分為兩組(n=21):疼

2、痛組和對照組。疼痛組大鼠行左側坐骨神經結扎術,建立CCI模型,對照組行假手術。分別于術前1d和術后1、3、5、7、14、21d測機械痛閾(MWT)和熱痛閾(TWL)。采用免疫組織化學染色和Real-time PCR技術檢測DRG中GDNF和NCAM的表達變化。實驗2:成年雄性SD大鼠24只,隨機分為四組(n=6):生理鹽水(NS)對照組、NS+GDNF組、c3d+GDNF組、Anti-NCAM+GDNF組。各組大鼠于行CCI模型后3d鞘

3、內注射上述制劑,觀察其痛閾變化。
　　 數(shù)據以均數(shù)±標準差(-x±s)表示,采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件處理。機械痛閾值、熱痛閡值、GDNF、NCAM mRNA和蛋白表達的組內比較采用雙因素方差分析,組間比較采用協(xié)方差分析。P≤0.05,為差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結果:
　　 實驗1:與對照組相比,疼痛組術前1d、術后1、21d MWT和TWL無顯著差異(P＞0.05);術后3、5、7、14d MWT和TWL均

4、降低,其中術后7d閾值最低(P＜0.01);術后3、5、7、14d GDNF和NCAM的表達均升高,其中7d表達最高(P＜0.01)。
　　 實驗2:與NS對照組相比,NS+GDNF組、c3d+GDNF組MWT和TWL明顯降低(P＜0.01),Anti-NCAM+GDNF組無顯著差異(P＞0.05);NS+GDNF組、c3d+GDNF組與給藥前相比,MWT和TWL明顯降低(P＜0.01), Anti-NCAM+GDNF組無顯著差