腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子復合導管對大鼠坐骨神經(jīng)損傷修復的影響.pdf

1、周圍神經(jīng)損傷在現(xiàn)代臨床上極為常見，對于少量缺損可行斷端無張力的縫合，對于較大范圍的缺損自體神經(jīng)移植仍是目前臨床治療的首選方法，也是研究其他方法治療周圍神經(jīng)缺損的“金標準”。近年來隨著生命科學、材料學及相關物理、化學方法的發(fā)展，利用組織工程方法修復周圍神經(jīng)缺損已成為可能，也就是用生物或非生物材料制成的神經(jīng)支架導管橋接周圍神經(jīng)損傷斷端，為損傷神經(jīng)再生提供再生通路。神經(jīng)再生需要合適的促神經(jīng)再生營養(yǎng)因子和引導環(huán)境，本課題研究生物可降解材料和腦源

2、性神經(jīng)營養(yǎng)因子(brain-derived neurotrophicfactor，BDNF)在周圍缺損性神經(jīng)損傷后再生的作用。將生物可降解性材料聚乳酸作為支架材料，BDNF作為促神經(jīng)再生的營養(yǎng)因子，制備成腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子復合導管，并對其進行了性能和活性評價，包括導管的表面形態(tài)觀察、力學性能、親疏水性、釋藥特性、釋藥活性及動物體內評價，為BDNF復合導管的臨床應用提供一定的參考。
　　本課題通過溶劑揮發(fā)法制備復合導管，并對導管進行

3、了體內外評價。將復合導管浸入磷酸鹽緩沖液中，觀察浸入前后導管的表面形態(tài)變化。采用萬能材料試驗機考察其力學性能，接觸角測試儀評價其親疏水性，結果BDNF導管材料的拉伸強度為1.80 MPa，斷裂伸長率為204.17％，接觸角為65.4°。說明導管具有一定的柔韌性和親水性。
　　采用ELISA法分別測定BDNF復合導管在釋放液中6h，1d，4d，7d，14d，28 d，60 d，90 d時BDNF的含量，考察其釋藥特性。結果表明藥物緩

4、慢釋放可達90 d，說明復合導管具有緩釋性能。
　　利用BDNF對SH-SY5Y細胞的增殖作用來檢測復合導管釋放液中的BDNF是否存在活性。以空白培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞為對照組，分別將復合導管6h，1d，4d，7d，14d，28 d，60 d，90 d時的釋放液與SH-SY5Y細胞共培養(yǎng)24 h后，加入MTT，通過酶標儀檢測各組的吸光度值。結果發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，和釋放液共培養(yǎng)的各組細胞的吸光度值均有增高，各組的吸光度值與對照組有顯著性

5、差異(P＜0.05)，表明BDNF復合導管在不同時間點釋放出的BDNF是具有生物活性的。
　　將24只SD大鼠隨機分為自體神經(jīng)移植組、生理鹽水組、BDNF溶液組和BDNF復合導管組，每組六只。各組動物固定、麻醉后離斷分別造成左側10 mm的坐骨神經(jīng)缺損。A組行自體神經(jīng)移植，B、C、D組行外膜與導管的縫合。術后觀察大鼠的大體行為，三個月后進行坐骨神經(jīng)的電生理特性、小腿三頭肌濕重恢復率的測定和組織學觀察。結果術后所有大鼠均存活，3個月

6、后BDNF復合導管組再生神經(jīng)通過導管，長入神經(jīng)缺損的遠側端。電生理檢測:BDNF導管組的潛伏期、波幅與自體神經(jīng)移植組相比，無明顯差異(P＞0.05)，而運動傳導速度與自體神經(jīng)移植組相比差異顯著(P＜0.05)，但優(yōu)于生理鹽水組和BDNF溶液組。小腿三頭肌濕重恢復率:各組小腿三頭肌均有不同程度的萎縮，BDNF復合導管組與自體神經(jīng)移植組萎縮程度最小，兩組之間統(tǒng)計學分析無顯著差異(P＞0.05)。組織學觀察:BDNF復合導管組與自體神經(jīng)移植組