腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子復(fù)合導(dǎo)管對大鼠坐骨神經(jīng)損傷修復(fù)的影響.pdf

1、周圍神經(jīng)損傷在現(xiàn)代臨床上極為常見，對于少量缺損可行斷端無張力的縫合，對于較大范圍的缺損自體神經(jīng)移植仍是目前臨床治療的首選方法，也是研究其他方法治療周圍神經(jīng)缺損的“金標(biāo)準(zhǔn)”。近年來隨著生命科學(xué)、材料學(xué)及相關(guān)物理、化學(xué)方法的發(fā)展，利用組織工程方法修復(fù)周圍神經(jīng)缺損已成為可能，也就是用生物或非生物材料制成的神經(jīng)支架導(dǎo)管橋接周圍神經(jīng)損傷斷端，為損傷神經(jīng)再生提供再生通路。神經(jīng)再生需要合適的促神經(jīng)再生營養(yǎng)因子和引導(dǎo)環(huán)境，本課題研究生物可降解材料和腦源

2、性神經(jīng)營養(yǎng)因子(brain-derived neurotrophicfactor，BDNF)在周圍缺損性神經(jīng)損傷后再生的作用。將生物可降解性材料聚乳酸作為支架材料，BDNF作為促神經(jīng)再生的營養(yǎng)因子，制備成腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子復(fù)合導(dǎo)管，并對其進(jìn)行了性能和活性評價(jià)，包括導(dǎo)管的表面形態(tài)觀察、力學(xué)性能、親疏水性、釋藥特性、釋藥活性及動物體內(nèi)評價(jià)，為BDNF復(fù)合導(dǎo)管的臨床應(yīng)用提供一定的參考。
　　本課題通過溶劑揮發(fā)法制備復(fù)合導(dǎo)管，并對導(dǎo)管進(jìn)行

3、了體內(nèi)外評價(jià)。將復(fù)合導(dǎo)管浸入磷酸鹽緩沖液中，觀察浸入前后導(dǎo)管的表面形態(tài)變化。采用萬能材料試驗(yàn)機(jī)考察其力學(xué)性能，接觸角測試儀評價(jià)其親疏水性，結(jié)果BDNF導(dǎo)管材料的拉伸強(qiáng)度為1.80 MPa，斷裂伸長率為204.17％，接觸角為65.4°。說明導(dǎo)管具有一定的柔韌性和親水性。
　　采用ELISA法分別測定BDNF復(fù)合導(dǎo)管在釋放液中6h，1d，4d，7d，14d，28 d，60 d，90 d時BDNF的含量，考察其釋藥特性。結(jié)果表明藥物緩

4、慢釋放可達(dá)90 d，說明復(fù)合導(dǎo)管具有緩釋性能。
　　利用BDNF對SH-SY5Y細(xì)胞的增殖作用來檢測復(fù)合導(dǎo)管釋放液中的BDNF是否存在活性。以空白培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞為對照組，分別將復(fù)合導(dǎo)管6h，1d，4d，7d，14d，28 d，60 d，90 d時的釋放液與SH-SY5Y細(xì)胞共培養(yǎng)24 h后，加入MTT，通過酶標(biāo)儀檢測各組的吸光度值。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，和釋放液共培養(yǎng)的各組細(xì)胞的吸光度值均有增高，各組的吸光度值與對照組有顯著性

5、差異(P＜0.05)，表明BDNF復(fù)合導(dǎo)管在不同時間點(diǎn)釋放出的BDNF是具有生物活性的。
　　將24只SD大鼠隨機(jī)分為自體神經(jīng)移植組、生理鹽水組、BDNF溶液組和BDNF復(fù)合導(dǎo)管組，每組六只。各組動物固定、麻醉后離斷分別造成左側(cè)10 mm的坐骨神經(jīng)缺損。A組行自體神經(jīng)移植，B、C、D組行外膜與導(dǎo)管的縫合。術(shù)后觀察大鼠的大體行為，三個月后進(jìn)行坐骨神經(jīng)的電生理特性、小腿三頭肌濕重恢復(fù)率的測定和組織學(xué)觀察。結(jié)果術(shù)后所有大鼠均存活，3個月

6、后BDNF復(fù)合導(dǎo)管組再生神經(jīng)通過導(dǎo)管，長入神經(jīng)缺損的遠(yuǎn)側(cè)端。電生理檢測:BDNF導(dǎo)管組的潛伏期、波幅與自體神經(jīng)移植組相比，無明顯差異(P＞0.05)，而運(yùn)動傳導(dǎo)速度與自體神經(jīng)移植組相比差異顯著(P＜0.05)，但優(yōu)于生理鹽水組和BDNF溶液組。小腿三頭肌濕重恢復(fù)率:各組小腿三頭肌均有不同程度的萎縮，BDNF復(fù)合導(dǎo)管組與自體神經(jīng)移植組萎縮程度最小，兩組之間統(tǒng)計(jì)學(xué)分析無顯著差異(P＞0.05)。組織學(xué)觀察:BDNF復(fù)合導(dǎo)管組與自體神經(jīng)移植組