腺病毒介導的腦源性神經營養(yǎng)因子對大鼠脊髓急性損傷后神經細胞保護的研究.pdf

1、背景:脊髓損傷分為原發(fā)性損傷和繼發(fā)性損傷，原發(fā)性損傷是受傷瞬間對脊髓造成的不可逆損傷，很少有脊髓損傷是對脊髓的直接物理性橫斷，大多是挫傷、壓迫或者牽拉造成的損傷，所以仍有部分脊髓是完好的，這就給恢復神經功能提供了可能。既往的研究表明，脊髓損傷后局部神經營養(yǎng)因子不足是脊髓損傷后修復面臨的主要問題之一。在這些研究中，腦源性神經營養(yǎng)因子(BDNF)的作用尤為矚目。
　　目的:本研究將以脊髓損傷SD大鼠為模型，通過導入腺病毒介導的腦源性神

2、經營養(yǎng)因子(Adv-BDNF)，上調大鼠BDNF基因的表達，并最終達到修復神經細胞、改善大鼠運動功能的目的。
　　方法:將實驗大鼠分為G1-4組，其中G1-3組手術創(chuàng)建大鼠急性脊髓壓迫損傷模型，G4組為假手術組。脊髓損傷模型建立后，于G1組大鼠損傷節(jié)段頭端5mm處注射Adv-BDNF，G2組大鼠同樣位置注射Adv-eGFP，G3組大鼠注射PBS做為對照。于術后1、3、7、14、28天取各組脊髓標本，通過檢測BDNFmRNA及蛋白評

3、價BDNF表達情況，標本行染色鏡檢評價組織損傷程度。同時通過行BBB評分評價大鼠運動功能恢復情況。
　　結果:術后3天取G2組脊髓切片鏡檢，見GFP散布整個頭端脊髓，提示腺病毒基因逆行調控滿意。PCR及western blot結果提示在對照組(G3)中，BDNF的表達在傷后24h就顯著增加，但是3天后即減少，而且，這種BDNF的低表達狀態(tài)持續(xù)時間長達1星期。在實驗組1(G1)中，因損傷導致的BDNF表達下調較對照組(G3)要小很多

4、，并且在第2星期和第4星期有明顯的恢復表現。在術后1星期時，G1組的BDNF表達明顯高于G2組，而且無論是G1還是G2組均表現出比對照組(G3)更高的BDNF表達。G1組的標本在光鏡下觀察到的空腔較對照組(G3)要小，G2組在術后4周時觀察到的空腔最小，但是G1組的正常脊髓實質較G2組更多。BBB評分的結果表明，所有實驗動物的BBB評分均表現出了逐步好轉的跡象，在術后第7，14，28天時， G1組的BBB評分較G2組和對照組(G3)更高