轉(zhuǎn)DREB1A基因地被菊花后代性狀檢測及雜交選育.pdf

1、菊花是我國傳統(tǒng)名花之一，具有悠久的栽培歷史，其中地被菊花在園林綠化中發(fā)揮著重要的作用。本試驗以已獲得的分別由35S和rd29A啟動子驅(qū)動的轉(zhuǎn)AtDREB1A基因、具有低溫、干旱和鹽漬多重脅迫耐性的優(yōu)良地被菊花‘Fall Color’(Dendranthemagrandiflora(Ramat.) Kitamura‘Fall Color’)轉(zhuǎn)化植株為試驗材料，以組織培養(yǎng)的方式進行繁殖，對獲得的轉(zhuǎn)基因各株系后代植株進行了低溫、高溫脅迫條件下

2、的抗性檢測;利用轉(zhuǎn)基因植株與觀賞性較好的菊花品種進行常規(guī)雜交，對雜交后代進行了觀賞性狀和分子檢測，旨在獲得觀賞性強且綜合抗逆性強的地被菊花新品種中間材料，為地被菊花基因工程育種和常規(guī)雜交育種有機結(jié)合提供理論依據(jù)和現(xiàn)實依據(jù)。
　　轉(zhuǎn)基因株系以莖段為外植體進行組織培養(yǎng)擴繁，植株在大田中移栽成活率高且能夠正常生長，與野生型相比，轉(zhuǎn)化植株株高、冠幅、分枝角度性狀存在表型差異，花期、花色不存在表型差異。
　　在35℃高溫脅迫下，與野生

3、型相比，rd29A:DREB1A基因植株耐熱性增強，35S:DREB1A植株耐熱性較rd29A:DREB1A基因植株強。細(xì)胞膜質(zhì)傷害率、丙二醛含量、可溶性蛋白含量與外源基因的整合和表達(dá)具有相關(guān)性，推測外源DREB1A基因的插入影響了轉(zhuǎn)基因植株在高溫環(huán)境中的多種代謝調(diào)節(jié)，從而增強了轉(zhuǎn)基因植株的膜保護能力、膜脂過氧化能力等。且菊花對高溫脅迫有一段適應(yīng)過程。對轉(zhuǎn)化植株花芽分化進程石蠟切片觀察表明，38℃高溫脅迫下所有植株花芽分化受到抑制。與野

4、生型相比，轉(zhuǎn)基因植株花芽分化受抑制程度有所減弱，證明轉(zhuǎn)基因植株對于高溫環(huán)境的適應(yīng)能力比野生型植株有較大的增強，證實擬南芥DREB1A基因在地被菊花上異源超量表達(dá)能夠提高植株耐熱性。本實驗光照設(shè)定為長日照，實驗表明花芽一旦分化，長日照條件不可逆轉(zhuǎn)花芽分化進程。
　　2006～2007年哈爾濱冬季平均氣溫-10.0℃，日極端最低溫度-23℃;地面極端最低溫度-18.7℃。與野生型相比，2007年轉(zhuǎn)基因株系存活率高，露地越冬能力增強。以