轉(zhuǎn)AtDREB1A基因地被菊花雜交后代新材料選育.pdf

1、菊花是我國(guó)傳統(tǒng)名花,具有悠久的栽培歷史,在切花生產(chǎn)和庭院美化中應(yīng)用廣泛。地被菊花Ground cover Chrysanthemum(Dendranthema grandiflora(Ramat.)Kitamura)是菊花中的一個(gè)品種群,其觀賞性好、覆蓋力強(qiáng)、管理粗放,在城市園林綠化美化中起著非常重要的作用,但低溫、干旱等非生物逆境限制了地被菊花在北方寒冷地區(qū)及城市高燥地段的推廣與應(yīng)用。本研究采用分子育種與傳統(tǒng)育種技術(shù)相結(jié)合的方法,旨在

2、獲得觀賞性狀較好且綜合抗逆性強(qiáng)的地被菊花新材料,為地被菊花新品種選育奠定工作基礎(chǔ)。
　　 本研究以已獲得的分別由35S和rd29A啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的轉(zhuǎn)AtDREB1A基因、具有低溫、干旱和鹽漬多重脅迫耐性的優(yōu)良地被菊花'Fall Color'(Dendranthema grandiflora(Ramat.)Kitamura'Fall Color')轉(zhuǎn)化植株為母本,優(yōu)良的野生型地被菊花品種'東林瑞雪'等為父本,通過(guò)常規(guī)雜交獲得了384株

3、雜交后代植株。通過(guò)對(duì)雜交后代植株觀賞性狀的評(píng)價(jià)、耐寒性分析、單株選育、外源基因遺產(chǎn)穩(wěn)定性和表達(dá)分析等方面研究,初步獲得了具觀賞性及抗逆性強(qiáng)的地被菊花新材料。研究結(jié)果如下:
　　 經(jīng)調(diào)查發(fā)現(xiàn),F1代植株的株高、冠幅、花色等表型性狀均產(chǎn)生了廣泛的分離。經(jīng)2007年冬季覆蓋草簾防護(hù),雜交后代植株露地越冬成活率及莖芽萌發(fā)率均高于'秋艷'野生型植株,且大部分后代植株地上莖芽萌發(fā),表明雜交后代植株的抗寒性得到提高。雜交后代植株基因組DNAP

4、CR.檢測(cè)結(jié)果表明,外源AtDREB1A基因可以通過(guò)有性繁殖方式遺傳給雜交后代,外源DREB1A基因分離比例組合間有差異,介于2.9∶1～6∶1之間。
　　 經(jīng)過(guò)對(duì)F1代植株的外源基因的檢測(cè)、表型性狀及抗逆性等綜合性狀的調(diào)查研究,結(jié)合地被菊新品種選育百分制評(píng)選標(biāo)準(zhǔn),篩選出性狀優(yōu)良的單株6個(gè),分別記錄為A-38、A-112、A-136、B-25、C-48及D-82。
　　 建立了6個(gè)優(yōu)良單株的無(wú)性系和自交系?；蚪MDNAP

5、CR檢測(cè)結(jié)果表明,外源AtDREB1A基因能夠通過(guò)無(wú)性繁殖或有性繁殖方式穩(wěn)定遺傳給后代植株。進(jìn)一步進(jìn)行干旱和低溫脅迫的研究,結(jié)果表明,轉(zhuǎn)AtDREB1A基因地被菊花雜交后代植株對(duì)干旱脅迫及低溫脅迫的耐性均有所提高,RT-PCR檢測(cè)結(jié)果表明,在干旱、低溫脅迫條件下,與對(duì)照植株相比,外源AtDREB1A基因明顯超量表達(dá),且攜帶rd29A:DREB1A基因的雜交后代呈現(xiàn)誘導(dǎo)型超量表達(dá),攜帶35S:DREB1A基因的雜交后代呈現(xiàn)組成型超量表達(dá)。