胃乙醇脫氫酶與胃癌特征的相關性分析及酒精對胃癌細胞株作用的研究.pdf

1、背景與目的:
　　 胃癌是我國最常見的惡性腫瘤之一，胃癌的發(fā)生是多因素長期作用的結果，胃癌的發(fā)病率存在明顯的國家和地區(qū)差異。胃癌的確切病因尚未完全闡明，有研究顯示，幽門螺桿菌感染、飲食、吸煙及宿主的遺傳易感性是影響胃癌發(fā)生的重要因素。飲酒與胃癌發(fā)生的危險相關度目前仍有爭議。攝入酒精可直接刺激胃粘膜，與其代謝中間產(chǎn)物乙醛等因素共同造成胃粘膜損傷，導致胃粘膜上皮易受致癌物質侵犯或/和直接影響并導致粘膜上皮的惡性變。酒精的代謝過程中乙

2、醇脫氫酶(alcohol dehydrogenase，ADH)起著至關重要的作用，它主要分布在肝臟，在胃腸道及其他組織中也有少量分布，ADH是酒精代謝的限速酶，決定局部組織、血液中酒精及代謝產(chǎn)物的濃度，是飲酒過程影響人體的決定性因素之一。ADH的水平與胃癌的發(fā)生是否相關尚不明確。為進一步探討酒精刺激對胃癌細胞的作用，本研究收集胃癌患者組織標本及其臨床資料，檢測胃癌及癌旁組織中ADH表達并分析其與臨床及病理特征等因素的相關性。然后通過細胞

3、學實驗室研究，采用不同濃度梯度酒精刺激不同胃癌細胞株，初步評價不同濃度梯度酒精對胃癌細胞增殖、凋亡的影響，分析酒精干預后ADH在不同胃癌細胞株的表達水平，在細胞水平探索酒精對胃癌細胞的作用。
　　 方法:
　　 1、收集胃癌患者的臨床資料及組織標本，采用組織芯片技術處理胃癌及癌旁組織，免疫組化技術檢測乙醇脫氫酶在胃癌及癌旁組織中的表達情況，觀察不同胃組織中乙醇脫氫酶的表達情況，探討臨床特征、ADH表達與胃癌預后及臨床病理

4、特征之間的關系。
　　 2、采用不同濃度梯度的酒精(0.03125％、0.0625％、0.125％、0.25％、0.5％、1％、2％、4％、6％)處理MGC803、BGC823和SGC7901三種不同胃癌細胞株，以MTT法檢測酒精對細胞增殖的影響，并用流式細胞儀檢測細胞凋亡。
　　 3、采用WESTERN BLOT技術檢測不同濃度酒精(0.125％、0.25％、0.5％)處理MGC803、BGC823和SGC7901三種

5、胃癌細胞株乙醇脫氫酶的表達變化。
　　 結果:
　　 1、胃癌患者臨床及病理資料統(tǒng)計分析結果:
　　 (1)101例胃癌患者中男性64例，女性37例，年齡28-75歲，平均年齡57.46±10.88歲。
　　 (2)胃癌組織ADH表達水平與飲酒情況和胃癌TNM分期有關(p＜0.05);癌旁組織ADH表達水平則與年齡相關(p＜0.05)。
　　 (3)胃癌組織ADH不同表達生存曲線呈現(xiàn)有意義分離(P

6、＜0.05);危險及有害飲酒組與正常飲酒及未飲酒組的生存曲線出現(xiàn)分離(P＜0.05)。
　　 (4) COX風險比例模型單因素分析顯示:年齡因素、飲酒情況、ADH癌旁表達、陽性淋巴結數(shù)及腫瘤TNM分期等因素與胃癌預后相關(P＜0.05); COX風險比例多因素分析顯示，年齡與腫瘤TNM分期是胃癌預后相關的危險因素(P=0.000)，ADH癌組織中表達可能影響胃癌預后(P=0.064)（注:多因素COX回歸分析，方法用后退法，進入

7、標準為0.05，刪除標準為0.10。）。
　　 2、0.03125％-6％濃度梯度的酒精作用于MGC803、BGC823和SGC7901三種胃癌細胞株48h后，可顯著抑制胃癌細胞的增殖，并誘導胃癌細胞的凋亡。
　　 3、0.125％、0.25％、0.5％濃度的酒精作用予MGC803、BGC823和SGC7901三種胃癌細胞48h后，其ADH的表達顯著增加，且與酒精濃度呈正相關。
　　 結論:
　　 1、胃

8、癌及癌旁組織臨床資料及ADH表達分析結論:
　　 (1)胃癌組織ADH表達水平與飲酒情況和胃癌TNM分期有關，癌旁組織ADH表達水平與年齡相關。
　　 (2)胃癌組織ADH高表達組生存優(yōu)于低表達組，正常及無飲酒組生存優(yōu)于危險及有害飲酒組。
　　 (3)年齡、腫瘤TNM分期是胃癌預后相關的危險因素，ADH癌組織中表達可能影響胃癌預后。
　　 2、酒精可顯著降低胃癌細胞活性，較低濃度酒精同樣能抑制胃癌細胞增殖