Aurora-A基因在神經(jīng)母細(xì)胞瘤中的表達(dá)及與臨床分期、預(yù)后的關(guān)系.pdf

1、目的：
　　 神經(jīng)母細(xì)胞瘤（neuroblastoma，NB）是起源于胚胎期交感神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)嵴細(xì)胞的惡性腫瘤，是兒童時期最為常見的惡性腫瘤之一。目前研究認(rèn)為，NB分化是一個多種基因參與的復(fù)雜過程，細(xì)胞形態(tài)分化中許多癌基因的表達(dá)調(diào)控發(fā)生相應(yīng)的改變。Aurora-A激酶是近年來研究較熱門的一個有絲分裂蛋白激酶，它是絲氨酸/蘇氨酸激酶家族的一員，參與細(xì)胞中心粒和染色體分離的調(diào)節(jié)，在細(xì)胞的有絲分裂的進(jìn)行中發(fā)揮至關(guān)重要作用。該基因過度表達(dá)

2、可引起中心粒異常、染色體不穩(wěn)定和腫瘤形成，在人類多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中起到了至關(guān)重要的作用。本研究用實(shí)時熒光定量PCR方法檢測Aurora-A基因在NB中的表達(dá)情況，并探討其與臨床分期及預(yù)后的關(guān)系，旨在發(fā)現(xiàn)新型、獨(dú)立有效的預(yù)后標(biāo)記物。
　　 材料及方法：
　　 一、實(shí)驗(yàn)材料
　　 收集中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院2005年-2009年20例NB凍存組織和2007-2010年15例伴有骨髓轉(zhuǎn)移的NB骨髓標(biāo)本。35

3、例患兒就診年齡18天-9歲，小于1歲患兒15例，大于等于1歲患兒20例。全部病例均經(jīng)病理檢查確診。根據(jù)Evans分期：低分期組13例（Ⅰ期5例，Ⅱ期8例），中位生存期41.5月。高分期組22例（Ⅲ期7例，Ⅳ期15例），中位生存期25.0月。另取10例節(jié)細(xì)胞神經(jīng)瘤凍存組織作對照。
　　 二、實(shí)驗(yàn)方法
　　 從骨髓中提取單個核細(xì)胞；從單個核細(xì)胞中和搗碎的組織中提取總的RNA；將RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA；以cDNA模板，以Aur

4、ora-A為目的基因，以GAPDHA為內(nèi)參基因，采用實(shí)時熒光定量PCR SYBR Green Ⅰ方法檢測上述標(biāo)本中Aurora-A基因mRNA水平的表達(dá)情況；采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　 結(jié)果：
　　 1、Aurora-A基因在10例節(jié)細(xì)胞神經(jīng)瘤對照組中無表達(dá)，在35例NB標(biāo)本中都存在不同程度的表達(dá)，兩組具有顯著差異（P<0.01）；
　　 2、Aurora-A基因在低分期組中低表達(dá)（0.225

5、±0.096），高分期組中高表達(dá)（0.659±0.079）（P<0.01）；
　　 3、Aurora-A基因表達(dá)水平的高低與年齡有關(guān)，小于1歲者表達(dá)低（0.392±0.163），大于等于1歲者表達(dá)高（0.578±0.237）（P<0.05）；
　　 4、Aurora-A基因表達(dá)水平的高低與生存時間呈負(fù)相關(guān)（P<0.01）。
　　 結(jié)論：
　　 1、Aurora-A基因在惡性NB中高表達(dá)，可能參與NB的惡性