枯草芽孢桿菌Tpb55抗菌物質(zhì)純化及特性的初步研究.pdf

1、本文通過對枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)Tpb55抗菌物質(zhì)的純化和其特性進行研究，探明枯草芽孢桿菌rpb55菌株生防作用的機理，為該菌及所產(chǎn)活性物質(zhì)的開發(fā)利用提供依據(jù)，也可為我國植物病害生物防治抗性基因發(fā)掘、藥物的篩選等提供研究基礎，主要結(jié)果如下： 1.篩選出了適合枯草芽孢桿菌Tpb55產(chǎn)生抗菌活性物質(zhì)的培養(yǎng)液和培養(yǎng)條件即：葡萄糖10.0g、蛋白胨3.0g、MgSO40.5g、酵母膏1.5g和牛肉膏1.5g、

2、水1000ml，31℃，初始pH為7.0的條件下，180r/min振蕩培養(yǎng)72h產(chǎn)生的抗菌活性物質(zhì)最多。 2.抗菌譜測定表明，Tpb55產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)對多種植物病原真菌、細菌具有較強的抑制作用。Tpb55分泌的抗菌物質(zhì)具有較好的熱穩(wěn)定性，60℃溫度處理對其抑菌活性基本沒有影響，在較大pH范圍內(nèi)(pH5-10)比較穩(wěn)定，木瓜蛋白酶、蛋白酶K、胃蛋白酶對粗提液抗菌活性幾乎沒有影響，有機溶刺對Tpb55抗菌活性物質(zhì)影響不大，且活性物質(zhì)

3、疏水性較弱，抗菌物質(zhì)具有蛋白酶活性。Tpb55產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)對Alternariaalternata菌絲的生長和孢子萌發(fā)具有很強的抑制作用。使A.alternata的菌絲出現(xiàn)畸形，呈捻珠狀，菌絲頂端膨大形成泡囊，有的泡囊囊壁出現(xiàn)斷裂，抗菌物質(zhì)處理A.alternata孢子，能使孢子萌發(fā)產(chǎn)生泡囊。 3.通過DEAE Sepharose Fast Flow離子交換層析和SephadexG-75(1.6cm×80cm)凝膠層析對硫酸銨