通心絡(luò)對實驗性腦缺血保護作用的理論探討和機制研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學博士學位論文通心絡(luò)對實驗性腦缺血保護作用的理論探討和機制研究姓名：吳正國申請學位級別：博士專業(yè)：中西醫(yī)結(jié)合臨床指導教師：吳以嶺20060401中文摘要48h、72h分批處死部分動物(n=8)。各組大鼠用電鏡觀察腦缺血后皮層微血管超微結(jié)構(gòu)，應(yīng)用Evansblue法測定血腦屏障通透性，用干濕重法測定腦含水量，按照試劑盒說明書進行測定血漿ET和N0含量，免疫組化法測定缺血側(cè)皮層Ⅷ因子和微血管周圍IL一6和IL—l8的表達，通過流式

2、細胞儀測定缺血側(cè)皮層ICAM一1、IL一6和IL一1B的表達。2通心絡(luò)對實驗性腦缺血大鼠行為學和組織形態(tài)學的影響：實驗分組和造模同前，通過姿勢反射試驗、肢體不對稱應(yīng)用試驗和角落試驗進行行為學評分，TTC染色測定梗死面積和電鏡觀察神經(jīng)元的超微結(jié)構(gòu)改變。3通心絡(luò)對實驗性腦缺血后自由基的影響：實驗分組和造模同前，在相應(yīng)時間點頸動脈采血和斷頭取腦，按試劑盒步驟測定大鼠缺血后各個時間點血清和皮層的超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、谷

3、胱甘肽過氧化物酶(GSHPx)活性和丙二醛(MDA)含量的變化。4通心絡(luò)對實驗性腦缺血皮層氨基酸含量的影響：實驗分組和造模同前，在相應(yīng)時間點斷頭取腦，冰盤中分離缺血側(cè)皮層，用l％磺基水楊酸鈉溶液500ul勻漿，4℃15000r／min離心10分鐘，取上清。采用高效液相色譜儀(mpC)檢測天門冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、Y一氨基丁酸(GABA)含量。5通心絡(luò)對實驗性腦缺血皮層神經(jīng)元[Can]i的影響：實驗分組和造

4、模同前，在相應(yīng)時間點斷頭取腦，在冰盤中取視交叉后半影區(qū)皮層，進行單個神經(jīng)元皮層細胞的分離，應(yīng)用激光共聚焦觀察神經(jīng)元[Ca2]i的變化。6通心絡(luò)對實驗性腦缺血誘導的神經(jīng)細胞調(diào)亡的影響：實驗分組和造模同前，應(yīng)用流式細胞儀檢測缺血側(cè)皮層神經(jīng)細胞凋亡率，免疫組織化學法檢測缺血側(cè)皮層Caspase一3、P53和HSP70的表達，Wbstemblot和RTPCR方法分析缺血側(cè)皮層Caspase一3、P53和HSP70蛋白和mRNA的表達。仕甲多日木