腦梗死氣虛血瘀證大鼠模型的建立與評價.pdf

1、證候是疾病發(fā)生發(fā)展不同階段的病情動態(tài)時空變化的概括，是中醫(yī)辨證論治的核心，證候研究是中醫(yī)學(xué)術(shù)研究的中心。證候與疾病密不可分，研究證候離不開疾病，研究疾病也離不開證候，這是中醫(yī)對疾病與證候關(guān)系的經(jīng)典認識方法。腦梗死是臨床常見疾病，氣虛血瘀證可貫穿于該病全程。本課題以腦梗死氣虛血瘀證為切入點，通過線栓法和力竭性游泳，把腦梗死模型與氣虛血瘀證候模型復(fù)為一體，力求使氣虛作為始動因素、主要因素而貫穿氣虛血瘀模型的全過程，建立與臨床原型相似的腦梗死

2、氣虛血瘀證的病證結(jié)合模型，比較觀察模型動物氣虛血瘀表征與生物學(xué)指標(biāo)變化，進一步探索腦梗死氣虛血瘀證模型動物的敏感表征與指標(biāo)變化的關(guān)系，確立該模型的評價體系。 1．目的： 本實驗擬以力竭性游泳復(fù)合線栓法復(fù)制腦梗死氣虛血瘀證病證結(jié)合動物模型，探索病證結(jié)合動物模型的制作方法，通過對宏觀表征、神經(jīng)病學(xué)評分、腦組織病理變化及相關(guān)生化指標(biāo)變化的觀察，尋找表征與其他相關(guān)指標(biāo)的關(guān)系，建立病證結(jié)合模型的評價體系。 2．方法：

3、 健康雄性SD大鼠64只，體重(200±10)g，適應(yīng)性喂養(yǎng)3天后，隨機分為4組：正常組、單純游泳組、單純手術(shù)組、病證結(jié)合模型組，每組大鼠16只。正常組與單純手術(shù)組正常喂養(yǎng)3周，不進行任何干預(yù)；單純游泳組與病證結(jié)合模型組每天進行力竭性游泳訓(xùn)練，持續(xù)3周。3周后單純手術(shù)組與病證結(jié)合模型組通過線栓法建立缺血2小時，再灌24小時的腦梗死模型。對比觀察游泳與非游泳大鼠體重、進食量、活動量及手術(shù)死亡率；對比觀察手術(shù)前后大鼠一般狀態(tài)，術(shù)后6小時按

4、照Zea-longa評分標(biāo)準(zhǔn)對大鼠進行神經(jīng)癥狀體征評分；術(shù)后24小時：①每組大鼠隨機各取3只心臟灌注固定后取腦，再以4％的多聚甲醛固定1周后石蠟包埋制作患側(cè)大腦冠狀切片，進行常規(guī)HE染色后光鏡觀察腦組織形態(tài)學(xué)改變；②剩余大鼠斷頭取腦，制成腦組織勻漿進行生化指標(biāo)檢測，包括：丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性測定，一氧化氮(NO)含量及一氧化氮合酶(NOS)活性測定，乳酸(LD)含量及乳酸脫氫酶酶(LDH)活性測定。所得數(shù)據(jù)

5、用Excel軟件處理，應(yīng)用SPSS11.0軟件行單因素方差分析。 3．結(jié)果： 通過三周游泳訓(xùn)練，單純游泳組及病證結(jié)合模型組大鼠與正常組及單純手術(shù)組相比，飲食量減少、體重增長緩慢；倦怠嗜睡，喜欠伸，攻擊性、對抗性行為減少或消失；舌質(zhì)明顯暗淡，舌下脈絡(luò)增粗，瘀紫。線栓法造成腦梗死模型后，單純手術(shù)組死亡率(13％)明顯低于病證結(jié)合模型組死亡率(37％)，神經(jīng)癥狀體征較輕；再灌24小時后，前組大鼠恢復(fù)好，活動能力較強。兩組舌質(zhì)較

6、正常組更加黯淡，舌下脈絡(luò)有不同程度的瘀紫，增長，但復(fù)合模型組舌象變化較單純手術(shù)組明顯。 正常組及單純游泳組大鼠腦組織無缺血損傷改變，但單純游泳組大鼠腦組織血管增生明顯；單純手術(shù)組及復(fù)合模型組大鼠腦組織結(jié)構(gòu)出現(xiàn)缺血性形態(tài)改變，復(fù)合模型組大鼠腦組織損傷更為嚴(yán)重。復(fù)合模型組腦組織中SOD活性(81.58±24.47)和單純手術(shù)組腦組織中SOD活性(61.41±20.74)較正常組(106.66±6.40)顯著降低P<0.05。復(fù)合模型

7、組腦組織中脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA的含量(1.26±0.19)和單純手術(shù)組腦組織中脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA含量(1.03±0.31)較正常組(0.0.64±0.07)明顯增多(P<0.05)。 4．結(jié)論： 4．1在單次和反復(fù)多次力竭性游泳，造成氣虛血瘀的基礎(chǔ)上再復(fù)合腦梗死制作病證結(jié)合動物模型，從動物生活習(xí)性改變、一般狀態(tài)改變，神經(jīng)功能改變等表征觀察，以及相關(guān)的病生理指標(biāo)、生化指標(biāo)檢測，一定程度上綜合模擬出腦梗死氣虛血瘀證候特點。