UCP5在腦梗塞大鼠腦組織中的動態(tài)表達.pdf

1、目的:
　　本研究基于建立大鼠永久性大腦中動脈閉塞(MCAO)缺血模型，通過應(yīng)用神經(jīng)功能行為學(xué)評分、腦組織TTC染色及病理學(xué)觀察對大鼠腦缺血模型給予評價，探索局灶性腦缺血后大鼠腦組織中解偶聯(lián)蛋白5(uncoupling protein5，UCP5)的表達情況，以進一步探討腦梗塞后腦損傷的可能機制。
　　方法:
　　選用健康雄性Sprague-Dawley大鼠，體重250g～300g，運用血管內(nèi)栓線方法制作大鼠左側(cè)MCA

2、O腦缺血模型。實驗動物隨機（隨機數(shù)字法）分為假手術(shù)對照組(n=7)和缺血組(n=60)，缺血組又分為5個缺血亞組:缺血6小時組(n=12)、缺血12小時組(n=12)、缺血1天組(n=12)、缺血3天組(n=12)及缺血7天組(n=12)，缺血組于SD大鼠術(shù)后清醒（術(shù)后3小時）行神經(jīng)功能行為學(xué)評分，如有造模不成功或死亡，則隨機補充。分別從假手術(shù)對照組及5個缺血亞組（缺血6小時、12小時、1天、3天、7天）中隨機抽取2只SD大鼠進行斷頭處

3、理，快速取出腦組織，切片后置于2％的2，3，5-三苯基氯化四氮唑(TTC)中染色，以觀察腦組織梗塞灶，各組其余SD大鼠均斷頭處理后完整取出腦組織，經(jīng)多聚甲醛溶液浸泡固定后制作石蠟切片，然后行HE染色及免疫組織化學(xué)染色以觀察大腦腦梗塞后腦組織細胞病理學(xué)變化及UCP5的表達情況。
　　結(jié)果:
　　1、冠狀位腦切片經(jīng)TTC染色后，正常腦組織顯示鮮紅色，梗死區(qū)腦組織顯示蒼白色，在假手術(shù)組中未見蒼白色梗死灶，在腦缺血6小時組、12小時

4、組、1天組、3天組、7天組中均可見蒼白色梗死區(qū)域。
　　2、HE染色顯示在假手術(shù)組中未見腦組織結(jié)構(gòu)及神經(jīng)元異常改變，在腦缺血6小時組、12小時組、1天組、3天組、7天組SD大鼠梗塞灶側(cè)腦組織中可見壞死區(qū)域，缺血中心區(qū)的神經(jīng)元及膠質(zhì)細胞等正常組織結(jié)構(gòu)消失，細胞出現(xiàn)腫脹，核碎裂等現(xiàn)象;位于缺血半影區(qū)的神經(jīng)元和膠質(zhì)細胞可見細胞變性及數(shù)目減少，胞質(zhì)可呈嗜酸性改變及神經(jīng)基質(zhì)腫脹等現(xiàn)象。
　　3、UCP5在腦缺血6小時組、12小時組、1

5、天組、3天組、7天組中均檢測到陽性表達;在假手術(shù)組中偶見少量陽性表達神經(jīng)細胞。腦缺血6小時組、12小時組、1天組、3天組、7天組分別與假手術(shù)對照組進行比較，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，缺血各組UCP5陽性表達細胞數(shù)明顯高于假手術(shù)對照組，具有顯著差異(P＜0.001)。
　　4、在腦缺血6小時組、12小時組、1天組、3天組、7天組之間進行兩兩比較，結(jié)果示缺血6小時組腦組織UCP5表達升高，缺血12小時組腦組織UCP5表達繼續(xù)增高，于缺血1天組UC