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文檔簡介
1、目的:采用傳代的人腦多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(glioblastomamultiforme,GBM)新鮮手術(shù)標(biāo)本來建立呈侵襲性生長及表皮生長因子受體(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)高表達(dá)的人腦GBM裸小鼠腦原位移植模型,然后在此已建立的能保持親本腫瘤生物學(xué)特性的人腦惡性膠質(zhì)瘤原位移植模型基礎(chǔ)上,把EGFR抑制劑與常規(guī)化療藥物或與血管內(nèi)皮生長因子受體-2(vascularendothelialgrowth
2、factorreceptor-2,VEGFR2)抑制劑聯(lián)合應(yīng)用來治療人腦GBM移植瘤,以探討不同作用機(jī)理的化學(xué)治療藥物聯(lián)合應(yīng)用后對(duì)GBM的療效。
方法:將傳代的新鮮人腦GBM手術(shù)標(biāo)本行裸小鼠右尾狀核接種后第3d用于分組實(shí)驗(yàn)。(1)40只鼠隨機(jī)分為4組,10只/組,各組鼠分別應(yīng)用靶向EGFR的蛋白酪氨酸激酶抑制劑AG1478(25mg/kg.次)、CDDP(3mg/kg.次)、AG1478+CDDP(25mg/kg.次+3m
3、g/kg.次)及磷酸鹽緩沖液(PBS,0.lml/只,次)。PBS和藥物均腹腔注射,每2d一次,共4次,用藥后分別觀察各組荷瘤鼠生存期。再取40只鼠,重復(fù)上述實(shí)驗(yàn),腫瘤移植后14d處死所有組鼠取腦,HE染色后觀察各組移植瘤形態(tài)及體積變化;EnVision和WesternBlot法檢測移植瘤中EGFR、磷酸化EGFR(P-EGFR)、增殖活性(Ki-67labellingindex,即Ki-67LI)、血管內(nèi)皮生長因子(vasculare
4、ndothelialgrowthfactor,VEGF)、白細(xì)胞介素一8(IL-8)和微血管密度(microvesseldensity,MVD)變化;TUNEL法檢測移植瘤細(xì)胞凋亡(apoptoticindex即AI)變化。(2)40只荷瘤鼠隨機(jī)分為4組,10只/組,分別應(yīng)用靶向EGFR的單克隆抗體C225(50mg/kg.次)、靶向VEGFR-2的單克隆抗體DCI01(40mg/kg.次)、C225+DC101(50mg/kg.次+4
5、0mg/kg.次)及PBS(0.1ml/只,次)。PBS組和藥物均腹腔注射,每2d一次,共4次。腫瘤移植后14d,處死所有組鼠取腦,HE染色觀察各組移植瘤形態(tài)及體積變化;EnVision法檢測移植瘤中基質(zhì)金屬蛋白酶-1(matrixmetalloproteinase,MMPl)、MVD及增值活性變化;TUNEL法檢測腫瘤細(xì)胞凋亡變化。
結(jié)果:(1)與對(duì)照組生存期為19.4±0.6d比較,單用CDDP或AG1478后荷瘤鼠生
6、存期分別為20.7±0.4d和20.8±0.6d(P>O.05),而CDDP+AG1478組荷瘤鼠生存期為33.6±0.gd(P 7、,DC101+C225組移植瘤體積下降了62.9%(P 8、的MVD無明顯變化(P>O.05);DC101組腫瘤細(xì)胞Ki-67LI下降了53.2%(P<0.05),DC101+C225聯(lián)合用藥后Ki-67LI下降了56.4%(P
結(jié)論:(1)AG1478與CDDP聯(lián)合
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