黃芩素對D-氨基半乳糖-內毒素誘導急性肝衰竭預防作用及相關機制研究.pdf

1、目的：研究黃芩素對D-氨基半乳糖聯(lián)合內毒素誘導小鼠肝衰竭動物模型的預防作用及相關作用機制。
　　方法：應用DPPH測定黃芩素抗氧化清除自由基能力；從血清丙氨酸氨基轉化酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉化酶（AST）、腫瘤壞死因子（TNF-α）、一氧化氮（NO）、誘導性一氧化氮合成酶（iNOS）和肝組織中谷胱甘肽（GSH）等水平出發(fā)評價D-氨基半乳糖（D-galactosamine，D-GalN，700 mg/kg）聯(lián)合內毒素（LPS，1

2、0μg/kg）誘導小鼠肝衰竭動物模型。黃芩素肝保護作用研究，將C57BL/6雄性小鼠隨機分為正常對照組、模型組、黃芩素低劑量組（50mg/kg）、黃芩素中劑量組（100mg/kg）、黃芩素高劑量組（150mg/kg）、水飛薊素陽性對照組（100mg/kg），腹腔注射D-GalN/LPS后，2h后采血測定TNF-α含量，6h后取血取肝臟，測定血清ALT、AST、NO、iNOS，將肝臟分成兩部分，一部分存放于10％中性福爾馬林，一部分存放液

3、氮后置于-80℃低溫冰箱保存，備用。測定小鼠肝組織中丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）以及谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性。采用western blot測定小鼠肝組織中細胞因子，caspase-3、caspase-8、Bax、Bcl-2、FLIP的蛋白表達。
　　結果本實驗研究結果表明：1）黃芩素能夠抗氧化清除自由基，對自由基的清除隨著濃度的增大而增大，呈現(xiàn)一定的量效關系，但

4、增加到一定濃度時，清除率基本不變；黃芩素對DPPH自由基清除作用大于黃芩苷。2）D-GalN/LPS誘導小鼠急性肝衰竭動物模型，在小鼠存活情況下，6h時血清ALT、AST達最高峰；6h肝組織中GSH含量消耗達最低；TNF-α在2h升高具有顯著性差異，其后逐漸降低，6h時基本恢復正常；血清NO、iNOS含量2h后開始升高，6h升高最多。3） D-GalN/LPS誘導小鼠急性肝衰竭動物模型，預防給予黃芩素，小鼠血清ALT、AST水平顯著下降

5、，TNF-α下降相對于對照組具有顯著性差異；血清NO、iNOS相對于正常組降低具有顯著性差異；肝組織中GSH、SOD、CAT、GSH-Px活性升高、MDA降低均具有顯著性差異；caspase-3與caspase-8激活片段被抑制，下調Bax和FLIP蛋白表達，上調Bcl-2的蛋白表達。
　　結論：黃芩素能預防D-GalN/LPS誘導小鼠急性肝衰竭的發(fā)生,減輕肝臟損傷，其作用其機制可能是為清除自由基，抗氧化；降低肝組織中 MDA含量