納米銅IUD對(duì)家兔子宮內(nèi)環(huán)境的影響.pdf

1、宮內(nèi)節(jié)育器（Intrauterine Device，IUD）是一類作用于局部，而對(duì)機(jī)體生理功能影響較少的避孕工具，因其長(zhǎng)效、安全、簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)、可復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)而得到廣泛的使用，其中，含銅IUD（Cu-IUD）的避孕效果和副作用均較突出。目前Cu-IUD中使用的銅材料均為裸銅，裸銅IUD 在放置初期存在銅離子的爆釋現(xiàn)象，釋放產(chǎn)物以銅的氧化物為主，這種銅離子的過(guò)量釋放以及產(chǎn)生的大量銅的氧化產(chǎn)物可能是導(dǎo)致置器后子宮異常出血、疼痛的主要原因。故，

2、如何實(shí)現(xiàn)對(duì)銅離子釋放過(guò)程的可調(diào)可控，減少爆釋現(xiàn)象和銅氧化產(chǎn)物的過(guò)量產(chǎn)生實(shí)為材料突破的核心。
　　 納米銅復(fù)合材料宮內(nèi)節(jié)育器（Nano-Cu/LDPE-IUD）其材料是由純納米銅微粒與低密度聚乙烯材料聚合而成。用這一新型材料可以達(dá)到兩種效果，一是發(fā)揮納米粒子的高催化性和高選擇性，二是通過(guò)聚合物的穩(wěn)定作用使銅離子長(zhǎng)效穩(wěn)定釋放，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)銅離子釋放過(guò)程的可調(diào)可控，達(dá)到減少銅的爆釋和穩(wěn)定宮腔液中銅離子含量的目的。
　　 為檢驗(yàn)其

3、實(shí)際效果，本工作從以下四方面進(jìn)行了研究：
　　 第一部分：納米銅復(fù)合材料宮內(nèi)節(jié)育器對(duì)家兔子宮內(nèi)膜超微結(jié)構(gòu)的影響
　　 目的：比較檢查放置不同材料宮內(nèi)節(jié)育器后家兔子宮內(nèi)膜超微結(jié)構(gòu)變化，從超微結(jié)構(gòu)水平評(píng)價(jià)納米銅復(fù)合材料宮內(nèi)節(jié)育器導(dǎo)致的異物反應(yīng)，比較分析不同類型節(jié)育器對(duì)子宮內(nèi)膜組織和細(xì)胞的影響程度。
　　 方法：健康、清潔、成熟、雌性未孕日本大耳白兔40只，體重為2.0～2.5Kg，隨機(jī)分為五組，空白對(duì)照組、裸銅組、支

4、撐材料組(LDPE組)、低劑量納米銅（5～10μg/220mm2含）組、高劑量納米銅（10～20μg/220mm2）組。采用掃描電鏡技術(shù)和透射電鏡技術(shù)檢查各組置器后家兔子宮內(nèi)膜超微結(jié)構(gòu)的改變。
　　 結(jié)果：置裸銅宮內(nèi)節(jié)育器56天后的子宮內(nèi)膜，上皮細(xì)胞排列較疏松，細(xì)胞間隙明顯增寬；上皮細(xì)胞中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張明顯，線粒體嵴模糊，大量空泡形成。置器72天裸銅組家兔子宮內(nèi)膜超微結(jié)構(gòu)改變更為明顯。置納米銅復(fù)合材料宮內(nèi)節(jié)育器后的子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞的

5、改變主要是微絨毛稀疏變短，細(xì)胞漿內(nèi)可現(xiàn)少量空泡。兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)差異不明顯。
　　 結(jié)論：納米銅復(fù)合材料宮內(nèi)節(jié)育器與裸銅宮內(nèi)節(jié)育器相比，前者對(duì)家兔子宮內(nèi)膜的刺激作用較輕。
　　 第二部分：納米銅復(fù)合材料宮內(nèi)節(jié)育器對(duì)家兔子宮內(nèi)膜勻漿t-PA、PAF、PGE2 水平的影響
　　 目的：比較分析不同材料宮內(nèi)節(jié)育器對(duì)家兔子宮內(nèi)膜勻漿液中t-PA、PAF、PGE2 水平的影響。
　　 方法：動(dòng)物及分組同第一部分。采用酶聯(lián)

6、免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)各組置器后的家兔子宮內(nèi)膜勻漿液中t-PA、PAF、PGE2 水平。
　　 結(jié)果：與裸銅組相比，納米銅組家兔子宮內(nèi)膜勻漿液中t-PA 及PGE2 水平均降低。
　　 結(jié)論：結(jié)果提示，納米銅宮內(nèi)節(jié)育器可減少裸銅節(jié)育器所致的t-PA和PGE2 水平升高，其減輕宮腔內(nèi)環(huán)境異物刺激的能力優(yōu)于裸銅IUD。
　　 第三部分：納米銅復(fù)合材料宮內(nèi)節(jié)育器對(duì)家兔子宮內(nèi)膜PAI-1、P物質(zhì)、P物質(zhì)受體表達(dá)的影

7、響
　　 目的：檢測(cè)PAI-1、SP和SP-R 在置不同材料宮內(nèi)節(jié)育器后家兔子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)，分析納米銅復(fù)合材料宮內(nèi)節(jié)育器減輕異物刺激發(fā)生的機(jī)制。
　　 方法：動(dòng)物及分組同第一部分，采用免疫組化S-P法檢測(cè)PAI-1、SP和SP-R 在置器后家兔子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)。
　　 結(jié)果：PAI-1 主要表達(dá)于子宮內(nèi)膜血管壁周圍、平滑肌細(xì)胞和部分腺上皮細(xì)胞的胞漿，且納米銅組家兔子宮內(nèi)膜中PAI-1表達(dá)明顯高于裸銅組。

8、SP 及SP-R 均主要表達(dá)于內(nèi)膜血管壁周圍、平滑肌細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞胞漿中，且納米銅組家兔子宮內(nèi)膜中SP和SP-R的表達(dá)明顯低于裸銅組。
　　 結(jié)論：納米銅復(fù)合材料宮內(nèi)節(jié)育器與裸銅宮內(nèi)節(jié)育器相比，可增加PAI-1的表達(dá)，同時(shí)降低SP和SP-R的表達(dá)。因而可能減輕節(jié)育器所致的副反應(yīng)。
　　 第四部分：家兔子宮內(nèi)膜細(xì)胞與銅離子共培養(yǎng)后MMP2 mRNA表達(dá)水平和凋亡標(biāo)記分子的檢查
　　 目的：檢測(cè)不同濃度銅離子溶液作用

9、于體外培養(yǎng)家兔子宮內(nèi)膜細(xì)胞不同時(shí)間后MMP2mRNA表達(dá)和細(xì)胞凋亡指數(shù)變化，藉此分析銅離子濃度和作用時(shí)間與MMP2mRNA表達(dá)和細(xì)胞凋亡的關(guān)系。
　　 方法：體外培養(yǎng)家兔子宮內(nèi)膜細(xì)胞成功后，銅離子終濃度分別為8×10-5M，1.6×10-4M，3.2×10-4M，干預(yù)細(xì)胞，分別于12h、24h和48h 收集細(xì)胞爬片，設(shè)空白對(duì)照組。
　　 采用原位雜交方法檢測(cè)MMP2 mRNA 在兔子宮內(nèi)膜組織細(xì)胞中的表達(dá)和熒光法檢測(cè)細(xì)胞

10、凋亡指數(shù)。
　　 結(jié)果：MMP2 mRNA 陽(yáng)性表達(dá)定位于胞漿,部分在胞核中。銅離子作用于子宮內(nèi)膜細(xì)胞后，MMP2 mRNA 平均吸光度逐漸升高，呈時(shí)間劑量依賴性，較空白對(duì)照組差異有顯著性。各組都有細(xì)胞凋亡存在，各組間凋亡指數(shù)比較差異無(wú)顯著性。
　　 結(jié)論：伴隨銅離子濃度升高作用時(shí)間延長(zhǎng)，家兔子宮內(nèi)膜細(xì)胞MMP2 mRNA表達(dá)增強(qiáng)。
　　 本實(shí)驗(yàn)條件下，銅離子濃度對(duì)體外培養(yǎng)子宮內(nèi)膜細(xì)胞凋亡影響不明顯。提示，裸銅I