花椒藥材質量標準研究.pdf

1、花椒為兩基原品種，來源于蕓香科植物青椒 Zanthoxylum schinifolium Sieb. et Zucc.或花椒Zanthoxylum bungeanum Maxim.的干燥成熟果皮，具溫中止痛，殺蟲止癢的功效。經(jīng)作者系統(tǒng)查閱中國藥典，自《中國藥典》1977年版一部首次收錄花椒藥材起，以后歷版藥典均收錄，且將花椒和青椒共同作為花椒藥材來源。前期研究表明花椒和青椒在化學成分、遺傳多樣性、主要藥效等方面均存在明顯差異，但藥典現(xiàn)行

2、標準并未將花椒和青椒這兩個基原加以區(qū)分。
　　本文對花椒的藥用沿革和藥材樣品來源進行了考證與調查；對其薄層鑒別和揮發(fā)油成分進行了研究，并在此基礎上修訂提高了質量標準。所起草的質量標準草案已通過四川省食品藥品檢驗檢測院復核，現(xiàn)已上報國家藥典委員會作為2015版中國藥典花椒藥材標準。本文對藥典收載品種花椒、青椒與地方品種竹葉花椒的揮發(fā)油成分進行了系統(tǒng)研究，并建立了花椒、青椒的特征圖譜。研究內容如下：
　　1.本草考證
　　

3、花椒別名紅椒、大紅袍，始載于《詩經(jīng)》?！渡褶r本草經(jīng)》記載花椒有“溫中，逐寒濕痹痛”的功效，此為花椒藥用之最早記載，且其根據(jù)花椒的產(chǎn)地不同將花椒分為“秦椒”和“蜀椒”，此后的本草亦然。據(jù)考證，歷代本草所載之“秦椒”和“蜀椒”均應為今之蕓香科植物花椒 Z. bungeanum Maxim.。至唐宋時期，花椒的種植范圍已逐步擴大，在“秦地”和“蜀地”的周邊地區(qū)亦多有種植，且秦地亦有蜀椒種。此時區(qū)分“秦椒”和“蜀椒”已不能僅僅根據(jù)其產(chǎn)地的不同，

4、而要從果實的大小、形態(tài)和種子的顏色等方面區(qū)分?？梢姡捎陂L期的分布區(qū)域不同和生存環(huán)境差異，“秦椒”和“蜀椒”在其外觀形狀方面已形成明顯差異?！吨袊幍洹?977年版一部首次收錄花椒藥材，并將花椒和青椒同作花椒藥材來源。
　　2.藥材樣品收集及來源調查
　　本次研究收集了15批花椒樣品和16批青椒樣品。經(jīng)鑒定，15批花椒樣品均為蕓香科植物花椒 Z. bungeanum Maxim.的干燥成熟果皮；16批青椒樣品中，5批為蕓香科

5、植物青椒 Z. schinifoliun Sieb. et Zucc.的干燥成熟果皮，11批為蕓香科植物竹葉花椒Zanthoxylum armatum DC.的干燥成熟果皮。
　　由市場調查和鑒定結果發(fā)現(xiàn)，花椒品種明確，在全國范圍內廣泛使用，為主流的花椒藥材來源；青椒和竹葉花椒存在同名異物現(xiàn)象，市售的青椒大多為竹葉花椒 Z. armatum DC.的干燥成熟果皮。由于產(chǎn)地和使用范圍大幅萎縮，青椒已不是花椒藥材的主要來源，且竹葉花椒

6、在市場大量流通。竹葉花椒作為花椒藥材來源收錄于《湖南省中藥材標準》1993年版中。因此，本文對藥典收載品種與地方品種竹葉花椒的揮發(fā)油成分進行了比較研究，為更好的利用竹葉花椒資源奠定基礎。
　　3.薄層鑒別
　　由于花椒和青椒的薄層色譜行為差異較大，僅以花椒對照藥材作為對照存在局限。本研究對花椒藥材的薄層色譜鑒別進行了研究，增設了青椒 Z. schinifolium Sieb. et Zucc.對照藥材，制定了青椒對照藥材標準

7、，并分別優(yōu)化了青椒、花椒的薄層色譜鑒別方法。結果顯示，該方法操作簡單方便，重現(xiàn)性和專屬性強，能有效鑒別花椒、青椒及地方品種竹葉花椒。
　　4.揮發(fā)油成分研究
　　4.1揮發(fā)油含量測定
　　揮發(fā)油是花椒的主要活性成分，也是《中國藥典》2010年版（一部）花椒藥材質量控制的含量測定指標。對不同產(chǎn)地的花椒、青椒和竹葉花椒進行揮發(fā)油含量的測定，結果花椒揮發(fā)油平均含量為2.07％，青椒揮發(fā)油平均含量為1.41%，竹葉花椒揮發(fā)油平

8、均含量為5.36%?；ń泛颓嘟返膿]發(fā)油含量具有一定差異，故分別制定了花椒和青椒的揮發(fā)油含量標準，規(guī)定青椒含揮發(fā)油不得少于1.1%（ml/g）；花椒含揮發(fā)油不得少于1.5%（ml/g）。竹葉花椒揮發(fā)油含量明顯高于花椒和青椒，表明竹葉花椒作花椒藥用具有一定科學性。
　　4.2揮發(fā)油組成成分分析
　　對不同產(chǎn)地的花椒、青椒和竹葉花椒揮發(fā)油組成成分進行分析。采用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，用氣相色譜-質譜聯(lián)用法對其化學成分進行檢測，以A

9、MDIS（自動質譜退卷積定性系統(tǒng)）結合保留指數(shù)對其化學成分進行分析鑒定。分析鑒定結果為：15批花椒揮發(fā)油共分析鑒定成分83個；5批青椒揮發(fā)油共分析鑒定成分45個；11批竹葉花椒揮發(fā)油共分析鑒定成分49個?；ń窊]發(fā)油主要含有檸檬烯、芳樟醇、乙酸芳樟酯、β-月桂烯、γ-松油烯、(-)-4-萜品醇和α-松油醇等；青椒揮發(fā)油主要含有愛草腦、芳樟醇、檸檬烯、大根香葉烯 D和石竹烯等；竹葉花椒揮發(fā)油主要含有芳樟醇、檸檬烯、(-)-4-萜品醇、乙酸芳

10、樟酯、α-松油醇和大根香葉烯 D等?；ń窊]發(fā)油中相對含量最高的為檸檬烯和芳樟醇；青椒揮發(fā)油中相對含量最高的為愛草腦；竹葉花椒揮發(fā)油中相對含量最高的為芳樟醇。結果表明，花椒、青椒和竹葉花椒三者的揮發(fā)油組成成分差異較大。
　　4.3特征圖譜研究
　　中藥特征圖譜以整體觀念和模糊理念為原則，對中藥的真?zhèn)舞b定及質量評價具有重要意義。本研究以正己烷為溶劑，采用超聲提取的方法，以氣相色譜-質譜聯(lián)用法分別對花椒和青椒的特征圖譜進行研究。該

11、方法操作簡便，提取時間短，提取溫度低，能有效避免水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油成分過程中的提取時間長、提取溫度高導致熱敏物質變性等問題。分別建立了花椒和青椒的特征圖譜。本論文所建立的特征圖譜可明顯區(qū)別花椒、青椒及地方品種竹葉花椒，對花椒藥材的鑒別和質量控制具有參考價值。
　　5.其他成分分析
　　本研究試圖建立花椒和青椒的酰胺類、生物堿、香豆素類等成分的含量測定標準。但由于酰胺類成分不穩(wěn)定，花椒和青椒中生物堿種類不一、且含量極低，此