亞抑菌濃度抗菌藥物對金黃色葡萄球菌耐藥性及SOS基因表達的影響.pdf

1、目的：
　　 探討抗菌藥物對金黃色葡萄球菌耐藥性的發(fā)生、SOS系統(tǒng)在金黃色葡萄球菌耐藥機制中的作用，探討相應臨床對策。
　　 方法：
　　 (1)瓊脂稀釋法測定50株金黃色葡萄球菌，其中耐甲氧西林菌株(MRSA)30株、甲氧西林敏感菌株(MSSA)20株，對環(huán)丙沙星、阿米卡星、萬古霉素的最小抑菌濃度(MIC)，探討是否存在萬古霉素MIC漂移或耐藥，以及金葡菌對其他抗菌藥物的敏感性；
　　 (2)選取標準株

2、、環(huán)丙沙星耐藥的MRSA、環(huán)丙沙星敏感的MSSA各1株。亞抑菌濃度(Sub-MIC)抗菌藥物單一用藥及聯(lián)合用藥：1/2MIC環(huán)丙沙星、1/2MIC阿米卡星、1/2MIC萬古霉素、1/4MIC(環(huán)丙沙星+阿米卡星)、1/4MIC(環(huán)丙沙星+萬古霉素)作用0h、6h、12h時獲取菌株，SYBR實時定量PCR法測定SOS基因recA轉錄水平；
　　 (3)測定上述藥物作用0h及12h時所有菌株對臨床常用的12種抗菌藥物的MIC水平，并

3、分析MIC變化與recA表達之間的相關性關系；
　　 (4)Fisher確切概率法檢測所得MIC值各組間差異的統(tǒng)計學意義，p<0.05判斷為差異有意義。
　　 結果：
　　 (1)50株菌株對環(huán)丙沙星、阿米卡星耐藥率分別為65.40％、21.90％，對萬古霉素均敏感，MIC分布范圍為0.38～2.0mg/L。其中30株MRSA菌株中萬古霉素MIC≤0.5mg/L的有13株，占43.33％，1mg/L的有15株，占

4、50.00％，2mg/L的有2株，占6.67％；20株MSSA菌株中MIC為≤0.5mg/L的有11株，占55.00％，1mg/L的有9株，占45.00％。Fisher確切概率法描述MRSA與MSSA兩組之間萬古霉素MIC值差異無統(tǒng)計學意義(P=0.545>0.05)。所測MRSA菌株萬古霉素MIC幾何均值、MIC50、MIC90分別為0.78 mg/L、1 mg/L、1 mg/L，較2006年均值水平(0.5mg/L)、MIC50(0

5、.5 mg/L)、MIC90(0.75 mg/L)顯示存在萬古霉素MIC漂移；
　　 (2)亞抑菌濃度環(huán)丙沙星、阿米卡星、萬古霉素作用后均可誘導金黃色葡萄球菌SOS基因recA表達增加：標準株內分別增加59.3倍、8.3倍、4.3倍，耐藥株內分別增加44.5倍、1.6倍、12.0倍。環(huán)丙沙星聯(lián)合其他藥物后較單一用藥增加多降低，1/4MIC(環(huán)丙沙星+阿米卡星)作用recA轉錄增加3.4倍(標準株)、26.3倍(耐藥株)，較環(huán)丙沙

6、星單一作用降低約17.4倍(標準株)、1.7倍(耐藥株)；1/4MIC(環(huán)丙沙星+萬古霉素)作用recA轉錄增加3.3倍(標準株)、16.9倍(耐藥株)，較環(huán)丙沙星單一作用降低約18.0倍(標準株)、2.6倍(耐藥株)。但敏感株內藥物作用前后recA轉錄均很低，未超出原代株水平。
　　 (3)亞抑菌濃度三種藥物作用12小時后，標準株內環(huán)丙沙星及左氧氟沙星MIC增加2～4倍，苯唑西林及頭孢曲松MIC增加1～2倍，阿米卡星MIC增加

7、約2倍，其余7種抗菌藥物MIC有0～2倍的增加，但均在敏感范圍；耐藥株內環(huán)丙沙星、阿米卡星、苯唑西林、頭孢曲松、左氧氟沙星、利福平MIC增加≥1倍，仍然保持耐藥，其余6種藥物敏感性無明顯變化；敏感株內12種抗菌藥物MIC無明顯變化。聯(lián)合用藥時較單一用藥各藥物MIC降低0～1倍。
　　 (4)相關性分析：標準株recA相對表達量與對應的環(huán)丙沙星MIC值之間相關系數(shù)r=0.772，p=0.072>0.05。即二者量值間無絕對相關性。

8、但從單一菌株內分析可見，recA表達增加時誘導性藥物引起自身及其他多種抗菌藥物如β-內酰胺類MIC輕度增加，而recA轉錄低下時藥物MIC無明顯變化。
　　 結論：
　　 (1)濟南地區(qū)金黃色葡萄球菌臨床分離株多表現(xiàn)為環(huán)丙沙星耐藥，但對萬古霉素均敏感，發(fā)現(xiàn)“MIC漂移”。
　　 (2)除氟喹諾酮類抗菌藥物外，氨基糖苷類和萬古霉素亞抑菌濃度作用亦可誘導金黃色葡萄球菌SOS基因recA表達增加。
　　 (3)