版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、目的:觀察杜仲葉綠原酸提取物(CAEF)對大鼠胰脂酶活性的影響,以及CAEF及其主要組分(綠原酸、槲皮素、京尼平苷)與西紅花苷聯(lián)合配比物(C+C+G+Q)對HepG2細胞膽固醇代謝環(huán)節(jié)中相關基因與蛋白表達的影響,探討其調(diào)脂與減肥作用機制,以求為臨床血脂異常、肥胖癥和動脈粥樣硬化的防治提供新的候選藥物。
方法:1.采用高脂乳劑及相應藥物(CAEF20%,CAEF42%和奧利司他)灌胃SD大鼠3d,收集3d內(nèi)的糞便,測定其中總
2、脂、總膽固醇(TC)與膽汁酸含量,以評價藥物對腸道脂肪吸收以及對胰脂酶活性抑制的影響;2.培養(yǎng)人肝癌HepG2細胞,通過MTT法繪制細胞生長曲線,以確定適宜的培養(yǎng)細胞數(shù)量及時間,并取對數(shù)期細胞進行實驗,確定此條件下CAEF的有效濃度范圍;3.分別用相應藥物對培養(yǎng)的HepG2細胞干預48h后,油紅O染色觀察藥物對細胞內(nèi)甘油三酯(TG)積聚的影響;4.分別以相應藥物干預培養(yǎng)的HepG2細胞24、48h后,測定細胞外液TC、TG的含量,觀察藥
3、物對細胞TC、TG外排的影響;5.RT-PCR測定ABCA1、SREBP2、CYP7A1、LXRα(NR1H3)、AMPKα2(PRKAA2)、HMGCR mRNA的表達量,觀察藥物對各基因表達的影響;6.免疫細胞化學和Western Blot觀察藥物對細胞HMGCR蛋白表達的影響。
結果:1.CAEF(42%)組大鼠糞便中的總脂含量既高于高脂模型組又高于奧利司他組(P<0.05),糞便中膽固醇與膽汁酸的含量也明顯高于高脂
4、模型組(P<0.05),CAEF(42%)表現(xiàn)出良好的抑制腸道脂肪吸收和增加膽固醇與膽汁酸排泄的作用;2.MTT比色法確定2×104/mL為實驗細胞濃度,25mg/L CAEF為實驗藥物濃度;3.油紅O染色觀察發(fā)現(xiàn),CAEF與C+C+G+Q作用48h后,細胞內(nèi)的中性脂滴明顯減少,同時CAEF與C+C+G+Q的作用均強于辛伐他汀與相應單組分,且C+C+G+Q強于CAEF;4.CAEF與C+C+G+Q分別作用24h、48h后,與對照組相比顯
5、著增加細胞TC、TG的外排(P<0.05),且其外排作用均明顯強于辛伐他汀與各單組分(P<0.05);5.RT-PCR研究發(fā)現(xiàn),CAEF和C+C+G+Q能顯著提高ABCA1、CYP7A1、AMPK2α mRNA表達(P<0.05),并明顯降低SREBP2、HMGCR mRNA的表達(P<0.05),且對ABCA1與AMPKα2 mRNA表達的增強作用順序為:C+C+G+Q>CAEF>辛伐他汀(P<0.05),另外,C+C+G+Q還能下調(diào)
6、LXRα mRNA的表達(P<0.05);6.免疫細胞化學法與Western Blot顯示CAEF與C+C+G+Q均能抑制HepG2細胞中HMGCR蛋白的表達,同時Western Blot也證明C+C+G+Q的抑制作用強于CAEF(P<0.05)。
結論:1.CAEF對急性脂質(zhì)負荷大鼠和人肝癌HepG2細胞模型均有較強的調(diào)脂作用,能夠抑制大鼠腸道對外源性食物的脂質(zhì)吸收,增加膽固醇、膽汁酸的排泄,抑制HepG2細胞內(nèi)中性脂肪
7、的積聚,增加HepG2細胞內(nèi)TC和TG外排;2.上述作用機制與CAEF抑制胰脂酶活性,調(diào)節(jié)細胞內(nèi)的膽固醇代謝途徑的相關基因:上調(diào)ABCA1、CYP7A1、AMPKα2,下調(diào)SREBP2、HMGCR mRNA的表達,以及抑制細胞內(nèi)HMGCR蛋白的表達有關;3.研究CAEF的調(diào)脂活性成分發(fā)現(xiàn),CAEF的主要成分與西紅花苷聯(lián)合(C+C+G+Q)也能夠上調(diào)ABCA1、CYP7A1、AMPKα2并下調(diào)SREBP2、HMGCRmRNA的表達,同時C
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 杜仲葉、梔子提取物制備分析及其減肥調(diào)脂作用機制初探.pdf
- 杜仲葉中綠原酸提取工藝研究.pdf
- 杜仲葉中綠原酸提取純化及杜仲種仁中桃葉珊瑚苷積累規(guī)律初探.pdf
- 杜仲葉中綠原酸的提取、純化研究.pdf
- 廣西山銀花提取物綠原酸抗炎作用及其分子機制研究.pdf
- 杜仲葉中綠原酸的提取及酶處理研究.pdf
- 杜仲葉中綠原酸提取純化綠色工藝的研究.pdf
- 杜仲葉多酚提取物對豬肉品質(zhì)及綠原酸緩解肝-腸損傷研究.pdf
- 杜仲葉中綠原酸的提取和分離工藝研究.pdf
- 杜仲葉中綠原酸的提取及動力學研究.pdf
- 杜仲葉中綠原酸的提取、分離純化工藝研究.pdf
- 羅勒提取物對高血脂癥大鼠的調(diào)脂作用及其機制研究.pdf
- 杜仲葉的有效成分及綠原酸提取工藝研究.pdf
- 杜仲葉中綠原酸和蘆丁的提取分離及純化.pdf
- 杜仲葉中綠原酸提取制備研究及綠原酸分子印記聚合物的合成和靜態(tài)吸附性質(zhì)初探.pdf
- 杜仲葉醇提取物的抗動脈粥樣硬化作用及機制研究.pdf
- 杜仲葉中高純度綠原酸的提取及穩(wěn)定性研究.pdf
- 馬鈴薯提取物皂苷抗糖尿病作用及其機制研究.pdf
- 杜仲葉提取物及其單體槲皮素、(+)-丁香脂素抑制BMSCs成脂分化研究.pdf
- 番石榴葉提取物輔助降血糖作用及其機制研究.pdf
評論
0/150
提交評論