杜仲葉多酚提取物對(duì)豬肉品質(zhì)及綠原酸緩解肝-腸損傷研究.pdf

1、杜仲是我國(guó)分布比較廣泛，種植面積較大的一種經(jīng)濟(jì)類作物。其葉資源非常豐富，研究表明杜仲葉的化學(xué)成分與皮相似，且綠原酸含量豐富，是它的主要活性成分。本文通過(guò)研究杜仲葉多酚提取物對(duì)瘦肉型豬肉品質(zhì)的改良作用，及其主要活性成分綠原酸對(duì)肝-腸道損傷的保護(hù)作用，并從調(diào)節(jié)機(jī)體能量生成的角度探索其可能的作用機(jī)理，為酚酸類化合物調(diào)節(jié)代謝平衡，改善亞健康狀態(tài)，提供理論支撐，有利于提高杜仲葉綜合開發(fā)利用率。
　　第一部分、杜仲葉多酚提取物對(duì)肥育豬肉品質(zhì)的

2、影響
　　選取體重為50kg左右的杜×長(zhǎng)×大肥育豬，隨機(jī)分為兩組：正常對(duì)照組（飼喂基礎(chǔ)日糧）和杜仲葉多酚提取物組（添加0.08％杜仲葉多酚提取物的基礎(chǔ)糧）。相對(duì)于正常對(duì)照組，杜仲葉多酚提取物能顯著提高肥育豬的體重，降低料肉比。干預(yù)30天后，血清總蛋白和肌酐水平顯著升高，60天后血清白蛋白，總蛋白，和肌酸的水平顯著升高，甘油三酯的含量顯著降低。背最長(zhǎng)肌的肉質(zhì)得到改善，肌肉的亮度，黃度，肌內(nèi)脂肪含量和肌纖維密度顯著升高，而肌纖維的直徑

3、顯著降低。
　　通過(guò)對(duì)肝臟，背最長(zhǎng)肌和背部脂肪中與脂肪酸代謝相關(guān)酶，以及肌纖維類型mRNA水平的表達(dá)，探索杜仲葉多酚提取物對(duì)肥育豬肉質(zhì)改善作用的可能機(jī)理。研究結(jié)果顯示，杜仲多酚提取物能提高肝臟LPL和AMPKmRNA的表達(dá)顯著升高，降低HSL，ACC，F(xiàn)AS，和PPAR-γmRNA的表達(dá)低；提高背最長(zhǎng)肌AMPK mRNA水平；降低LPL，F(xiàn)ABP-4，F(xiàn)ATP-1，和PPAR-γmRNA的表達(dá)；提高背部脂肪組織AMP mRNA的表

4、達(dá)，降低HSL，LPL，F(xiàn)AS，和FABP-4的mRNA表達(dá)。I型纖維在杜仲多酚提取物背最長(zhǎng)肌中mRNA的表達(dá)顯著升高，IIb型纖維的表達(dá)顯著降低。
　　以上研究結(jié)果表明，杜仲多酚提取物能提高肥育豬飼料利用率，改善背最長(zhǎng)肌的豬肉品質(zhì)，其對(duì)肉質(zhì)的改善作用與調(diào)節(jié)機(jī)體脂肪酸代謝和肌纖維類型有關(guān)。
　　第二部分、綠原酸對(duì)慢性內(nèi)毒素應(yīng)激大鼠肝-腸損傷的緩解作用
　　綠原酸是杜仲葉含量最高的一種酚酸，在膳食中普遍存在。內(nèi)毒素是生物

5、體腸道內(nèi)大量存在的一類抗原，易通過(guò)腸道屏障而進(jìn)入血液循環(huán)，因此機(jī)體極容易受到內(nèi)毒素的侵襲。接下來(lái)我們以慢性內(nèi)毒素應(yīng)激大鼠為研究對(duì)象，探索綠原酸對(duì)肝臟和腸道損傷的緩解作用。
　　1、綠原酸對(duì)慢性內(nèi)毒素應(yīng)激大鼠生長(zhǎng)性能的影響。
　　綠原酸能抑制慢性內(nèi)毒素應(yīng)激大鼠造成的體重增加，降低食物利用率。和慢性內(nèi)毒素應(yīng)激組相比，綠原酸干預(yù)后，肝臟，內(nèi)臟脂肪，脾臟和胸腺的相對(duì)重量顯著降低，同時(shí)內(nèi)臟脂肪的面積降低了25.24%，具有顯著差異性。

6、
　　2、綠原酸緩解慢性內(nèi)毒素應(yīng)激大鼠肝臟損傷。
　　和慢性內(nèi)毒素應(yīng)激組相比，綠原酸干預(yù)后血清總膽紅素含量、谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活力，以及肝組織髓過(guò)氧化物酶的活力顯著降低，且肝臟的形態(tài)結(jié)構(gòu)趨于正常。這一結(jié)果暗示綠原酸能緩解肝臟損傷。
　　能量生成障礙是造成肝損傷的重要因素。和慢性內(nèi)毒素應(yīng)激組相比，綠原酸干預(yù)后，肝臟線粒體的脂質(zhì)過(guò)氧化程度降低，ATP的含量和腺苷酸池（ATP+ADP+AMP），以及AMP/ATP的比值分

7、別增加了22.65%，30.51%，和45.69%，具有顯著差異性。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，綠原酸干預(yù)后與糖無(wú)氧酵解相關(guān)的酶的活力（己糖激酶，丙酮酸激酶，乳酸脫氫酶）及乳酸含量的顯著降低；丙酮酸脫氫酶，檸檬酸合成酶，NADH脫氫酶，琥珀酸脫氫酶，和ATPase的活力顯著增強(qiáng)。綠原酸能促進(jìn)慢性內(nèi)毒素應(yīng)激大鼠肝臟與線粒體生物合成關(guān)鍵蛋白（5'-AMP激活性蛋白激酶，過(guò)氧化物酶體增生物激活受體γ共激活因子1α，核呼吸因子1，和線粒體轉(zhuǎn)錄因子A）mRN

8、A的表達(dá)，以及5'-AMP激活性蛋白激酶的磷酸化。綜上，綠原酸能通過(guò)促進(jìn)線粒體的生物合成，增強(qiáng)線粒體氧化磷酸化水平，提高葡萄糖的有氧氧化，降低葡萄糖的無(wú)氧酵解，從而促進(jìn)肝臟ATP的生成，緩解慢性內(nèi)毒素應(yīng)激大鼠造成的肝臟損傷。
　　3、綠原酸調(diào)節(jié)慢性內(nèi)毒素應(yīng)激大鼠肝臟的脂肪代謝。
　　研究結(jié)果顯示，綠原酸能顯著抑制慢性內(nèi)毒素應(yīng)激造成的血清甘油三酯和游離脂肪酸含量的升高。綠原酸干預(yù)后肝臟甘油三酯和膽固醇的含量降低，乙酰輔酶A羧化

9、酶的含量、脂肪酸合成酶的含量和活力顯著降低；肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶1的含量和活力，以及脂肪酸的β-氧化顯著增強(qiáng)。通過(guò)氣相色譜對(duì)脂肪酸的組成進(jìn)行分析，結(jié)果顯示綠原酸干預(yù)后C18:3n-3的比例顯著增加，C18:3n-6，C20:1，和C24:1的比例，Δ6和Δ9-18脫氫酶活力顯著降低。綜上，綠原酸能通過(guò)抑制肝臟脂肪酸合成，促進(jìn)脂肪酸的氧化，調(diào)節(jié)脂肪酸的組成，緩解慢性內(nèi)毒素應(yīng)激大鼠造成的肝臟脂肪代謝紊亂。
　　4、綠原酸緩解慢性內(nèi)毒素應(yīng)激大

10、鼠腸道損傷。
　　腸道通透性的增加是內(nèi)毒素進(jìn)入機(jī)體內(nèi)環(huán)境的重要途徑。和慢性內(nèi)毒素應(yīng)激組相比，綠原酸能顯著降低乳果糖/甘露醇的比值，回腸損傷評(píng)分，和回腸髓過(guò)氧化物酶的活力?；啬c組織堿性磷酸酶的活性，總抗氧化能力和超氧化物歧化酶的活力顯著增強(qiáng)，回腸組織和線粒體丙二醛的含量顯著降低。同時(shí)線粒體NADH脫氫酶和琥珀酸脫氫酶的活力顯著增強(qiáng)。腸道通透性與線粒體脂質(zhì)過(guò)氧化呈正相關(guān)，與NADH脫氫酶的活力呈負(fù)相關(guān)。綜上，綠原酸能通過(guò)降低腸道線粒體