杜仲葉中高純度綠原酸的提取及穩(wěn)定性研究.pdf

1、綠原酸(ChlorogenicAcid),是一種重要的生物活性物質(zhì),具有抗菌、抗病毒、增高白血球、保肝利膽、抗腫瘤、降血壓、降血脂、清除自由基和興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)等作用。但是,由于綠原酸提取、分離及純化的方法通常都是單一使用,都沒有完全解決綠原酸產(chǎn)品的雜質(zhì)問題,如色素、單寧、多糖等,綠原酸純度一般在20-40％之間,綠原酸純度問題制約了綠原酸應(yīng)用領(lǐng)域。因此,本研究采用酶法-超聲波協(xié)同提取杜仲葉中綠原酸,大大提高了綠原酸的提取率。在對綠原酸

2、純化方面,結(jié)合采用大孔樹脂和混合溶劑分相法:先采用大孔樹脂對綠原酸進行初步富集,得到綠原酸粗品(42.6%,HPLC法);然后對綠原酸粗品使用混合溶劑分相法,得到高純度綠原酸(92.7%,HPLC法)。主要研究結(jié)果如下:
　　 1、通過正交實驗設(shè)計,選用纖維素酶在超聲波輔助作用下對杜仲葉中綠原酸進行了提取研究。最佳工藝參數(shù)為:酶的用量0.8%、提取溫度40℃,提取時間55min。按照優(yōu)化條件進行重復(fù)試驗,獲得綠原酸的含量為2.8

3、5mg/mL。
　　 2、采用大孔吸附樹脂對綠原酸初步純化時,選定306型大孔樹脂為綠原酸的吸附樹脂,調(diào)節(jié)溶液pH值為2.0左右上柱,流速3ml/min;吸附完畢后用75%的乙醇洗脫,洗脫率在92.4%以上。得到綠原酸粗品(42.6%,HPLC法)。
　　 3、在對綠原酸純化的混合溶劑萃取工藝中,最適萃取工藝參數(shù)為:萃取劑為乙酸丙酯,待萃取溶液的pH值為2.0,每次萃取時間為7.0min,萃取次數(shù)4次,綠原酸萃取率均達到

4、93.7%。
　　 4、在分相工藝中,選定正已烷為分相劑,確定其用量為萃取液總體積的50%,綠原酸轉(zhuǎn)移率達91.3%以上。最終得到純度為92.7%(HPLC法)的白色綠原酸產(chǎn)品。
　　 5、研究了抗氧化劑、pH值、金屬銅離子及絡(luò)合劑、有機溶劑對綠原酸的穩(wěn)定性的影響。結(jié)果表明,抗氧化劑對綠原酸有一定的抑制降解作用,亞硫酸氫鈉效果最好,L-半胱氨酸鹽次之,維生素C效果不明顯,焦亞硫酸鈉沒有效果;綠原酸在pH3左右時最穩(wěn)定;金