杜仲葉中杜仲醇的提取純化及表征.pdf

1、杜仲（Eucommia ulmoides Oliv.）是我國一種名貴的滋補(bǔ)藥材，資源非常豐富。杜仲葉中含有環(huán)烯醚萜類、木脂素類、黃酮類、苯丙素類等多種活性成分，而杜仲醇（Eucommiol，Eu）作為杜仲環(huán)烯醚萜中特殊的裂環(huán)環(huán)烯醚萜類化合物，其只存在于杜仲中，是杜仲中極具特異性的成分。
　　本文以杜仲葉為原料，在建立快速檢測(cè)杜仲葉中3種環(huán)烯醚萜類化合物方法的基礎(chǔ)上；優(yōu)化了杜仲醇的提取工藝；通過液液萃取-大孔吸附樹脂-半制備液相色譜

2、建立杜仲醇的純化工藝，并對(duì)杜仲醇進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征。研究?jī)?nèi)容如下:
　?。?）建立了快速同時(shí)檢測(cè)杜仲醇、桃葉珊瑚苷（Aucubin，Au）和京尼平苷酸（Geniposidic Acid，GPA）的高效液相色譜檢測(cè)方法。高效液相色譜條件為：色譜柱：Kromasil100-5C18(250×4.6 mm,5μm)，流動(dòng)相：甲醇（A）-0.1％磷酸水溶液（B），線性梯度洗脫程序：0~15 min，5%~7%A；15~16 min，7%~14%

3、A；16~25 min，14%~20%A；25~26 min，20%~50%A；26~35 min，50%~5%A。體積流量0.8 mL/min；柱溫35℃，進(jìn)樣量20μL。程序變化波長(zhǎng)：210 nm（0~12 min，杜仲醇）、202 nm（12~18 min，桃葉珊瑚苷）、238 nm（18~28 min，京尼平苷酸）。方法學(xué)考察結(jié)果表明檢測(cè)方法良好。
　　（2）研究了杜仲醇的超聲波輔助提取工藝和纖維素酶法輔助提取工藝。杜仲醇

4、的最佳超聲波輔助提取工藝為：液料比為30︰1（mL︰g），以水為溶劑，30℃超聲波輔助提取20 min，提取1次。在此實(shí)驗(yàn)條件下，杜仲醇的得率為0.3723%。杜仲醇的最佳纖維素酶法提取工藝為：液料比為25︰1（mL︰g），以pH為7的水為溶劑，加入纖維素酶為樣品干重的1.0%，在30℃水浴中酶解4 h，提取1次。在此實(shí)驗(yàn)條件下，杜仲總醇的得率為0.2357%。采用超聲波輔助提取所得杜仲醇得率較纖維素酶法提取高。
　?。?）采用液

5、液萃取-大孔吸附樹脂-半制備液相色譜儀聯(lián)用，對(duì)超聲波提取液中杜仲醇進(jìn)行純化研究。粗提液進(jìn)行醇沉、正丁醇萃取對(duì)杜仲葉粗提液進(jìn)行前處理，杜仲醇含量由0.3871%提高至1.154%；以吸附量為指標(biāo)，對(duì)比各型號(hào)大孔吸附樹脂對(duì)杜仲醇的吸附效果，結(jié)果顯示各型號(hào)大孔樹脂對(duì)杜仲醇的吸附效果均很不明顯。采用D101大孔吸附樹脂對(duì)杜仲醇進(jìn)行后續(xù)純化，大孔吸附樹脂動(dòng)態(tài)洗脫曲線表明杜仲醇主要位于Fr-5至Fr-14流份中，合并后液相檢測(cè)得其含量為8.302%