微生物發(fā)酵在杜仲葉膠提取中作用的研究.pdf

1、本研究針對(duì)杜仲膠提取中發(fā)酵這一重要環(huán)節(jié)，以杜仲葉為試驗(yàn)材料，從單一(復(fù)合)菌種的篩選、適宜菌種的最佳發(fā)酵時(shí)間、確定篩選適宜降解杜仲葉菌種的衡量指標(biāo)及發(fā)酵環(huán)節(jié)對(duì)杜仲葉膠提取的影響等方面進(jìn)行了試驗(yàn)研究。旨在探索杜仲葉膠提取工藝中最適發(fā)酵菌種及最佳發(fā)酵時(shí)間。為進(jìn)一步研究和提高目前杜仲葉膠生產(chǎn)中所采用的自然發(fā)酵效果提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，并為杜仲葉膠提取工藝優(yōu)化提供理論指導(dǎo)。其主要研究結(jié)果如下： 1.在杜仲葉膠提取工藝前期，使用纖維素酶酶解處理杜

2、仲葉，可促進(jìn)葉片組織降解，使杜仲葉粗膠產(chǎn)率及膠純度均有顯著提高，從而使精膠含量提高5.05％。由此可知，在提膠工藝中，纖維素酶對(duì)杜仲葉進(jìn)行前期酶解處理作用是顯著的。故可進(jìn)一步選擇適宜降解杜仲葉的菌類。 2.在篩選適宜降解杜仲葉單一菌種的試驗(yàn)中，供試的黑曲霉、黑曲霉BN、康氏木霉、綠色木霉、綠色木霉1、葡萄白腐菌、纖維素酶、平菇菌8種菌(酶)處理杜仲葉，可極顯著減少葉干重。不同菌(酶)處理對(duì)杜仲葉研磨過篩前后干重減少率達(dá)到極顯著(

3、P＜0.01)。黑曲霉BN、葡萄白腐菌、綠色木霉處理效果極顯著優(yōu)于纖維素酶處理，其中黑曲霉BN處理可使過篩前后干重減少率達(dá)到50.095％。因此可見，適宜菌種發(fā)酵處理和研磨過篩兩個(gè)步驟在提膠工藝中作用是顯著的，是提膠前期的重要環(huán)節(jié)。 經(jīng)過供試的8種菌(酶)處理杜仲葉，可極顯著降低葉片粗纖維含量。從而有效地分解破壞了含膠細(xì)胞壁，并且一定程度上也破壞了含膠細(xì)胞外圍的韌皮部、維管束系統(tǒng)及薄壁組織。這樣有利于杜仲膠的提取。各菌(酶)對(duì)粗

4、纖維降解能力高低依次為：黑曲霉BN、平菇菌、葡萄白腐菌、綠色木霉、黑曲霉、纖維素酶、綠色木霉1、康氏木霉。其中前四種菌處理效果極顯著優(yōu)于纖維素酶處理，粗纖維降解率均達(dá)50％以上。 平菇菌發(fā)酵處理后杜仲精膠含量極低，僅為0.026％，故不宜作為杜仲膠提取發(fā)酵工藝的菌種；其余7種菌(酶)處理精膠含量均高于未經(jīng)發(fā)酵對(duì)照處理，其中黑曲霉BN處理可使杜仲精膠含量提高17.756％。黑曲霉BN、葡萄白腐菌、綠色木霉、黑曲霉4種菌處理優(yōu)于纖維

5、素酶處理。 黑曲霉BN、葡萄白腐菌、綠色木霉可作為適宜降解杜仲葉的單一菌種。 3.降解杜仲葉復(fù)合菌種篩選試驗(yàn)，得出黑曲霉BN+葡萄白腐菌發(fā)酵杜仲葉可使發(fā)酵后干重與研磨過篩后干重比未經(jīng)發(fā)酵處理對(duì)照減少19.023％和52.724％；使過篩前后干重減少率達(dá)到44.867％；對(duì)杜仲葉粗纖維降解高達(dá)67.763％；粗膠產(chǎn)率和精膠含量比未經(jīng)發(fā)酵處理提高21.429％和26.017％。因此確定杜仲葉膠提取發(fā)酵工藝的適宜復(fù)合菌種為黑曲

6、霉BN+葡萄白腐菌。 4.對(duì)發(fā)酵后干重、過篩后干重、研磨過篩前后干重減少率、發(fā)酵液總糖含量、杜仲葉粗纖維降解率、所得粗膠產(chǎn)率、粗膠純度、粗膠中精膠含量等指標(biāo)綜合分析得出：研磨過篩前后干重減少率、杜仲葉粗纖維降解率和所提取粗膠中精膠含量三項(xiàng)指標(biāo)可作為杜仲膠提取工藝發(fā)酵環(huán)節(jié)中菌種篩選的評(píng)價(jià)指標(biāo)。 5.降解杜仲葉適宜復(fù)合菌種(黑曲霉BN+葡萄白腐菌)的發(fā)酵時(shí)間確定試驗(yàn)中，過篩前后干重減少率、葉片粗纖維降解率與精膠含量三項(xiàng)指標(biāo)在