天舒膠囊物質(zhì)基礎(chǔ)及其在生產(chǎn)過(guò)程中轉(zhuǎn)移規(guī)律.pdf

1、　　目的：指認(rèn)天舒膠囊(Tianshu capsule,TSC)HPLC指紋圖譜各色譜峰并對(duì)其進(jìn)行藥味歸屬；采用化學(xué)計(jì)量學(xué)方法開(kāi)展天舒膠囊治療偏頭痛的譜效關(guān)系研究,快速辨識(shí)其可能的藥效成分群；明確天舒膠囊主要藥效物質(zhì)在生產(chǎn)過(guò)程中的變化及其質(zhì)量傳遞規(guī)律。
　　方法：(1)收集天舒膠囊樣品 5批,采用 2010版《中國(guó)藥典》天舒膠囊標(biāo)準(zhǔn)【指紋圖譜】項(xiàng)下方法測(cè)定,開(kāi)展 HPLC指紋圖譜分析,盡可能全面的表征其化學(xué)成分類別。(2)采用

2、 HPLC對(duì)比分析,對(duì) TSC與原料藥材中化學(xué)成分的色譜峰進(jìn)行相關(guān)性研究,對(duì)各個(gè)色譜峰進(jìn)行藥源性歸屬。在對(duì)照品對(duì)照、在線紫外吸收光譜和質(zhì)譜裂解規(guī)律的基礎(chǔ)上,鑒定天舒膠囊 HPLC圖中的色譜峰。采用 HPLC 方法同步測(cè)定天舒膠囊中 3 個(gè)主要成分,天麻素、5-羥甲基糠醛和阿魏酸,并進(jìn)行了方法學(xué)驗(yàn)證。(3)根據(jù)天舒膠囊 HPLC圖中各色譜峰代表的化學(xué)成分的極性大小和物理化學(xué)特性,采用 Flash(快速液相儀)進(jìn)行不同極性組分的制備,并對(duì)各

3、組分進(jìn)行 HPLC指紋分析。(4)開(kāi)展與 TSC治療偏頭痛相關(guān)的體外藥理模型的研究,如 TSC組分對(duì) PC12細(xì)胞增殖抑制作用、對(duì)微血管內(nèi)皮細(xì)胞的作用、對(duì)氧糖剝奪模型腦神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的保護(hù)作用。(5)選擇主要藥效成分天麻素、阿魏酸和藳本內(nèi)酯,開(kāi)展溫度、pH值、光照對(duì)其化學(xué)穩(wěn)定性的影響。( 6)選擇天舒膠囊生產(chǎn)過(guò)程中的關(guān)鍵環(huán)節(jié),采用指紋圖譜結(jié)合多指標(biāo)定量,評(píng)價(jià)天麻素、阿魏酸和藁本內(nèi)酯在生產(chǎn)過(guò)程中的傳遞規(guī)律。
　　結(jié)果：(1)測(cè)定的

4、 5 批天舒膠囊樣品,批與批之間質(zhì)量具有很好的一致性。(2)基于對(duì)照品對(duì)照、在線全波長(zhǎng)紫外吸收以及 LC-MS/MS、LC-IT-TOF-MS提供的質(zhì)譜信息,對(duì)典型樣品中的主要色譜峰進(jìn)行了指認(rèn),從中推斷和指認(rèn)了38個(gè)化合物。將天舒膠囊與原料藥材進(jìn)行 HPLC比對(duì)分析,其中 9個(gè)色譜峰來(lái)源于天麻,29個(gè)色譜峰來(lái)源于川芎。 (3) 采用 Flash快速制備技術(shù)制備天舒膠囊水提組分 6個(gè)和醇提組分 6個(gè),并對(duì)各組分進(jìn)行了 HPLC指紋圖譜分析

5、和色譜峰指認(rèn)。(4)天舒醇提-1、醇提-5、醇提-6和天舒水提-1對(duì) PC12細(xì)胞增殖有抑制作用；水提-1、醇提-3、醇提-4和醇提-6表現(xiàn)出對(duì)氧糖剝奪的腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用；天舒膠囊水提和醇提組分均對(duì)氧糖剝奪的腦神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞有保護(hù)作用。(5)明確阿魏酸、藳本內(nèi)酯在高溫 80℃和 100℃下都有降解、異構(gòu),天麻素在室溫下與時(shí)間無(wú)明顯量時(shí)關(guān)系；阿魏酸在低 pH值條件下有明顯的異構(gòu)物產(chǎn)生,天麻素在不同 pH 值的環(huán)境中無(wú)明顯變化；阿魏

6、酸在光照條件下 5h 有順勢(shì)異構(gòu)體異阿魏酸產(chǎn)生,藳本內(nèi)酯在光 照條件下 5h 有明顯的開(kāi)環(huán)脫羥和脫羰的降解反應(yīng)。(6)模擬在不同溫度下的生產(chǎn)工藝, 80℃、100℃下,醇提取的步驟中天麻素、阿魏酸的轉(zhuǎn)移率占總轉(zhuǎn)移率的 82%以上；在醇提步驟原藥材中主要藥效物質(zhì)已被提取出來(lái),水提部位的提取率就較小,在 1.15%~6.80%之間。在醇提取液和水提取液濃縮過(guò)程中,天麻素、阿魏酸的含量無(wú)明顯變化,由于藁本內(nèi)酯的光敏及熱敏性,藁本內(nèi)酯的含量有所

7、降低。
　　結(jié)論：首次明確了天舒膠囊的化學(xué)組成,在化學(xué)成分的類別和數(shù)目以及相對(duì)和絕對(duì)含量上,天舒膠囊批與批之間都保持了很好的一致性；天舒醇提各組分和水提各組分對(duì)所選體外模型均表現(xiàn)出一定的藥理活性；天舒膠囊中的阿魏酸、藁本內(nèi)酯是光敏、熱敏性成分,天麻素在高溫下亦表現(xiàn)一定程度的熱不穩(wěn)定性；天麻素和阿魏酸在不同溫度下皆有動(dòng)態(tài)變化現(xiàn)象,在現(xiàn)有的工藝下,天舒膠囊中天麻素、阿魏酸總體可以維持在一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的水平,從而保證了天舒膠囊的產(chǎn)品質(zhì)