多巴胺對基質(zhì)金屬蛋白酶活性及牙本質(zhì)膠原降解的研究.pdf

1、目的：
　　探討多巴胺對基質(zhì)金屬蛋白酶活性及牙本質(zhì)膠原纖維降解的影響，以期為多巴胺的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　評價(jià)多巴胺對基質(zhì)金屬蛋白酶活性的影響：以2mg/ml多巴胺與100u/mlⅦ型膠原酶（基質(zhì)金屬蛋白酶的代表類型之一）混合液為實(shí)驗(yàn)組，以去離子水與100u/mlⅦ型膠原酶混合液為陰性對照組，以2mg/ml多巴胺與去離子水混合液為陽性對照組1，以2％氯己定與100u/mlⅦ型膠原酶混合液為陽性對照組2

2、，每組成分混合體積比均為1∶9，每組5個(gè)重復(fù)樣（n=5）。用細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶總活性比色法檢測各組混合15分鐘內(nèi)的酶活性。
　　評價(jià)多巴胺對脫礦牙本質(zhì)膠原纖維降解的影響：32個(gè)牙本質(zhì)片用37%磷酸酸蝕1分鐘，獲得脫礦的牙本質(zhì)片。2個(gè)用于掃描電子顯微鏡觀察表面形態(tài)，其余30個(gè)牙本質(zhì)片根據(jù)隨機(jī)數(shù)字表隨機(jī)分為3組（n=10）。陰性對照組：牙本質(zhì)片放入100μl去離子水+900μl膠原酶中；陽性對照組：牙本質(zhì)片放入100μl氯己定+900

3、μl膠原酶中；多巴胺組：牙本質(zhì)片放入100μl多巴胺+900μl膠原酶中。3組均放入恒溫孵箱（37℃）孵育7d后，通過羥脯氨酸測定試劑盒，檢測孵化液中羥脯氨酸含量，計(jì)算膠原降解量。同時(shí)，選取各組代表性樣品通過掃描電鏡觀察各組牙本質(zhì)片膠原形態(tài)。
　　評價(jià)多巴胺對脫水的脫礦牙本質(zhì)膠原纖維網(wǎng)形態(tài)的影響：將一個(gè)牙本質(zhì)片分為4份，均酸蝕30秒，沖洗。①組：去離子水中5分鐘，保持水膜；②組：多巴胺溶液中5分鐘，保持水膜；③組：去離子水中5分鐘

4、，吹干；④組：多巴胺溶液中5分鐘，吹干。然后立即梯度脫水，臨界點(diǎn)干燥，通過掃描電鏡觀察其形態(tài)。
　　結(jié)果：
　　陰性對照組的酶活性及膠原降解量[（0.089±0.011）μmol·min-1和（2836.88±200.71）μg/cm2]均顯著高于陽性對照組2[（0.038±0.006）μmol·min-1和（1288.47±171.78）μg/cm2]和多巴胺組[（0.030±0.009）μmol·min-1和（1388.