肝細胞移植實驗研究中大鼠肝細胞的分離培養(yǎng)及凍存復蘇.pdf

1、目的:以大鼠為實驗對象,研究肝細胞的分離制備的方法.觀察短期培養(yǎng)過程中肝細 胞活率、形態(tài)和功能的變化.探討冷凍復蘇及降溫速率對肝細胞的影響.為肝細胞移植所需"肝細胞庫"的建立奠定實驗基礎.結論:1.采用改良Seglen門靜脈-下腔靜脈雙插管交替 循環(huán)灌注法分離獲取游離肝細胞產率高、活性好、純度高.2.在一定 培養(yǎng)條件下,分離的 肝細胞經體外短期培養(yǎng),可一定程度地恢復因分離消化作用造成的損傷,并能很好地維持正常肝細胞特性.3.分離的肝細胞

2、可作為肝細胞移植研究及肝細胞冷藏復蘇研究較好的生物材料.4.冷凍復蘇過程使細胞膜完整性受損、細胞漿內容丟失導致細胞在復蘇后活率降低、細胞功能喪失.5.降溫速率的快慢直接關系凍存肝細胞 的效果,理想的降溫速率可以有效的 提高復蘇后細胞的活率與細胞功能.但最適的降溫程序仍有待進一步的研究與探討.6.冷凍對肝細胞的損傷是多種因素的綜合作用,但減少在降溫和解凍復蘇過程 對肝細胞膜的損傷 是成功冷藏肝細胞的關鍵之一.7.肝細胞在液氮中保存,其活率