蘆黃顆粒治療家兔實(shí)驗(yàn)性動(dòng)脈粥樣硬化的療效及機(jī)制初步研究.pdf

1、背景：動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis，動(dòng)脈粥樣硬化）是心腦血管疾病的主要病理基礎(chǔ)。它是發(fā)達(dá)國(guó)家人口死亡的主要原因，在發(fā)展中國(guó)家發(fā)病率和死亡率也越來越高，因此動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)制和抗動(dòng)脈粥樣硬化藥物越來越成為研究的熱點(diǎn)。其發(fā)病機(jī)理的研究以往主要圍繞三種學(xué)說：脂質(zhì)浸潤(rùn)學(xué)說、血栓形成學(xué)說和損傷反應(yīng)學(xué)說。隨著研究的逐步深入，1999年RossR教授在損傷反應(yīng)學(xué)說的基礎(chǔ)上，明確提出“動(dòng)脈粥樣硬化是一種炎癥性疾病”。其過程涉及到一些

2、化學(xué)因子、細(xì)胞因子及免疫因子，這些因子將動(dòng)脈粥樣硬化灶內(nèi)各種細(xì)胞間通過自分泌與旁分泌，相互聯(lián)系，相互影響，促進(jìn)病變的發(fā)展。國(guó)內(nèi)外多數(shù)研究認(rèn)為，動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展是一個(gè)多因素的復(fù)雜病理過程，其中心環(huán)節(jié)是低密度脂蛋白膽固醇（LDL—C）沉積在血管壁，隨之氧化修飾，炎癥細(xì)胞聚集、侵入和激活，導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化的產(chǎn)生。其中炎癥反應(yīng)貫穿了動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生、發(fā)展的整個(gè)過程，與斑塊的形成及穩(wěn)定密切相關(guān)。與防治血栓和再血管化相比，穩(wěn)定斑塊更具實(shí)際意義。蘆黃

3、顆粒由黃精、首烏、姜黃、紅花、虎杖、漏蘆諸藥組成，現(xiàn)代藥理研究表明，上述藥物可從不同環(huán)節(jié)發(fā)揮降脂、抗動(dòng)脈粥樣硬化作用。我們通過建立動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型，觀察蘆黃顆?？箤?shí)驗(yàn)動(dòng)物動(dòng)脈粥樣硬化的作用，旨在為臨床使用中藥干預(yù)動(dòng)脈粥樣硬化提供依據(jù)。 目的：通過建立實(shí)驗(yàn)性動(dòng)脈粥樣硬化的動(dòng)物模型，觀察蘆黃顆?？箘?dòng)脈粥樣硬化的作用，并對(duì)其機(jī)制加以探討。 1、觀察蘆黃顆粒對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化兔血脂的影響，了解蘆黃顆粒的降脂作用。2、觀察蘆黃顆粒

4、對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)脈粥樣硬化兔血清CRP和IL—6的影響，了解蘆黃顆粒的抗炎作用。3、通過對(duì)兔腹主動(dòng)脈的病理觀察及免疫組織化學(xué)檢測(cè)CD68、MCP—1的表達(dá)，了解蘆黃顆粒阻止動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)展及抗炎、穩(wěn)定斑塊的作用。 方法：1、建立模型和實(shí)驗(yàn)分組：本研究采用高脂飼料喂養(yǎng)及動(dòng)脈內(nèi)膜球囊損傷法建立動(dòng)脈粥樣硬化家兔模型。8周后造模成功，停喂原高脂飼料，改予普通飼料，并給藥8周。a假手術(shù)組（n=8）：假手術(shù)+普通飼料+蒸餾水；b動(dòng)脈粥樣硬化

5、模型組（n＝8）：動(dòng)脈內(nèi)膜損傷術(shù)+高脂飼料+蒸餾水；c血脂康組（n＝8）：動(dòng)脈內(nèi)膜損傷術(shù)+高脂飼料+血脂康（60mg/kg，藥物濃度：12mg/ml）；d蘆黃顆粒高劑量組（n=8）：動(dòng)脈內(nèi)膜損傷術(shù)+高脂飼料+蘆黃顆粒高劑量（1．38g/kg，藥物濃度：0．276g/ml）；e蘆黃顆粒低劑量組（n＝8）：動(dòng)脈內(nèi)膜損傷術(shù)+高脂飼料+蘆黃顆粒低劑量（0．345g/kg，藥物濃度：0．069g/ml）。2、標(biāo)本采取及指標(biāo)測(cè)定：各組兔分別于實(shí)驗(yàn)開

6、始前1天及實(shí)驗(yàn)開始后的第8，16周末，于清晨空腹稱重后，經(jīng)耳中央動(dòng)脈采血，總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG），高密度脂蛋白膽固醇（HDL—C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL—C）；于實(shí)驗(yàn)第16周末，經(jīng)耳中央動(dòng)脈采血，測(cè)C反應(yīng)蛋白（CRP）和白細(xì)胞介素—6（IL—6），并在第16周末以叩擊法處死所有動(dòng)物，留取主動(dòng)脈、髂動(dòng)脈作組織形態(tài)學(xué)觀察、免疫組織化學(xué)檢測(cè)斑塊巨噬細(xì)胞CD68、MCP—1的表達(dá)。3、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：應(yīng)用SPSS13．0軟件進(jìn)行統(tǒng)

7、計(jì)分析。計(jì)量資料兩組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，數(shù)據(jù)結(jié)果用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示；等級(jí)資料兩組間比較采用Wilcoxon秩和檢驗(yàn)。以P<0．05為差異具有顯著性。 結(jié)果：1、與動(dòng)脈粥樣硬化模型組相比，蘆黃顆粒高劑量組、可降低TC、LDL—C，差異有顯著性（P<0．05）；但與血脂康組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2、蘆黃顆粒高劑量組、血脂康組CRP明顯低于模型組，統(tǒng)計(jì)學(xué)有差異（P<0．05），但兩者之間無明顯差異。蘆

8、黃顆粒高、低劑量組及血脂康組均可顯著降低IL—6水平，與動(dòng)脈粥樣硬化模型組比較差異有顯著性（P<0．01，P<0．05）。3、在動(dòng)脈粥樣硬化病變中，蘆黃顆粒高劑量組CD68表達(dá)為弱陽(yáng)性，與血脂康組相似：動(dòng)脈粥樣硬化模型組CD68表達(dá)則增強(qiáng)。動(dòng)脈粥樣硬化模型組表達(dá)MCP—1明顯增強(qiáng)；蘆黃顆粒高、低劑量組與血脂康組均可減輕MCP—1的表達(dá)，與動(dòng)脈粥樣硬化模型組比較有顯著差異（P<0．01），但蘆黃顆粒高、低劑量組與血脂康組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。