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1、擬輪生鐮孢(Fusarium verticillioides)是玉米穗腐病的主要致病菌之一,不僅造成玉米嚴(yán)重的產(chǎn)量損失,而且產(chǎn)生的伏馬毒素污染玉米及其制品,給人畜健康造成重大威脅。本文分析了河北省和山東省玉米籽粒中鐮孢菌的群體組成,研究了我國(guó)擬輪生鐮孢的遺傳多樣性、產(chǎn)毒能力和致病力分化,同時(shí)測(cè)定不同擬輪生鐮孢菌株對(duì)苯醚甲環(huán)唑的敏感性,主要研究結(jié)果如下:
1.玉米籽粒中的鐮孢菌種群的分離和鑒定。結(jié)合形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)的方法,對(duì)2
2、013~2014年來自河北和山東省的186份玉米籽粒樣本進(jìn)行了分離,共分離出7種鐮孢屬和8種非鐮孢屬真菌。從河北省樣本中分離到擬輪生鐮孢(F.verticillioides)、層出鐮孢(F.proliferatum)、禾谷鐮孢(F.graminearum)、膠孢鐮孢(F.subglutinans)、泡狀鐮孢(F.bullatum),山東省除分離到上述鐮孢菌外,還分離到了6株木賊鐮孢(F.equiseti)和1株半裸鐮孢(F.incarn
3、atum)。其中擬輪生鐮孢為河北省和山東省的優(yōu)勢(shì)鐮孢菌,其次為層出鐮孢和禾谷鐮孢。兩地的鐮孢菌分離頻率均表現(xiàn)為2013年高于2014年,整體分離頻率分別為35.3%和36.7%。
2.擬輪生鐮孢遺傳多樣性分析。采用ISSR(Inter simple sequence repeats)技術(shù)分析了171株來自我國(guó)8個(gè)地區(qū)的擬輪生鐮孢的遺傳多樣性。利用篩選出的20條ISSR引物進(jìn)行擴(kuò)增,共獲得327條條帶,其中多態(tài)性條帶317條,分
4、子量在200 bp~5000 bp之間,平均每條引物可擴(kuò)增出16.4條條帶,表明我國(guó)玉米擬輪生鐮孢群體存在著豐富的遺傳多樣性。聚類分析表明,相同地區(qū)和相同年份的菌株更趨向于聚類到一起,表明擬輪生鐮孢的遺傳多樣性與地理來源和采集年份存在一定關(guān)系。
3.擬輪生鐮孢產(chǎn)毒能力與致病力分化。采用田間接種和高效液相色譜的方法測(cè)定了76株擬輪生鐮孢的產(chǎn)毒能力和致病性。結(jié)果發(fā)現(xiàn),產(chǎn)毒量最高和最低的菌株相差188倍,分別來自內(nèi)蒙古和河南;病情指
5、數(shù)相差4.3倍,致病性最強(qiáng)的菌株來自東北,最弱的菌株來自山東,說明菌株間產(chǎn)毒能力和致病力存在差異。顯著性分析表明各地區(qū)菌株的產(chǎn)毒能力存在明顯的差異性,東北、河北和云南地區(qū)菌株致病力存在顯著差異,其它6個(gè)地區(qū)菌株致病力差異不顯著。
4.擬輪生鐮孢對(duì)苯醚甲環(huán)唑敏感性測(cè)定。測(cè)定的157株擬輪生鐮孢的EC50分布在0.0192~0.4617μg/mL之間,最高值和最低值相差24倍,表明不同的擬輪生鐮孢菌株對(duì)苯醚甲環(huán)唑的敏感性存在一定差
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