仙茅抗骨質(zhì)疏松化學(xué)成分及品質(zhì)評(píng)價(jià)研究.pdf

1、仙茅是石蒜科植物仙茅Curculigo orchioides Gaertn.的根莖，為我國(guó)傳統(tǒng)中藥，在近兩版《中華人民共和國(guó)藥典》中均有收錄。具有補(bǔ)腎助陽(yáng)、益精血、強(qiáng)筋骨和行血消腫的作用，主要用于腎陽(yáng)不足、陽(yáng)痿遺精、虛癆內(nèi)傷和筋骨疼痛等病癥。仙茅的主要化學(xué)成分有環(huán)菠蘿蜜烷型三萜皂苷、酚及酚苷，木脂素及木脂素苷、黃酮等。藥理活性研究顯示仙茅屬植物具有調(diào)節(jié)免疫、抗氧化、保肝、保護(hù)心血管系統(tǒng)、改善味覺、補(bǔ)腎壯陽(yáng)及抗骨質(zhì)疏松等作用。 目

2、前臨床上很多防治骨質(zhì)疏松的方劑中都含有仙茅，然而其活性物質(zhì)基礎(chǔ)尚不清楚。本課題在明確仙茅防治骨質(zhì)疏松作用的基礎(chǔ)上，對(duì)仙茅的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)的分離和活性評(píng)價(jià)，明確了其中抗骨質(zhì)疏松的物質(zhì)基礎(chǔ)。同時(shí)，采用HPLC-UV技術(shù)對(duì)不同來源的仙茅藥材進(jìn)行了品質(zhì)評(píng)價(jià)。 以去卵巢骨質(zhì)疏松大鼠為模型，觀察了仙茅乙醇提取物的抗骨質(zhì)疏松作用，結(jié)果表明給服仙茅提取物的去卵巢大鼠的骨損失能夠得到明顯抑制，而且不會(huì)影響體重和子宮的變化。仙茅提取物能夠明顯地

3、增加去卵巢大鼠的血清P、Ca和OPG水平，抑制血清DPD/Cr、ACTH水平和TRAP活性，但對(duì)血清TNF-α、IL-6水平和ALP活性作用不明顯。 因此，仙茅潛在的抗骨質(zhì)疏松活性得以確認(rèn)，主要表現(xiàn)為抑制去卵巢的骨吸收和增強(qiáng)血清P、Ca水平，但對(duì)促進(jìn)骨形成不明顯。但是，仙茅抗骨質(zhì)疏松作用的具體機(jī)制和活性化學(xué)成分有待進(jìn)一步的研究。 利用常規(guī)色譜分離和制備高效液相色譜分離相結(jié)合，共從仙茅中分離得到7個(gè)單體化合物，應(yīng)用現(xiàn)代波譜

4、技術(shù)(UV， MS，IR，1H-NMR，13C-NMR，2D-NMR等)對(duì)其進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定。分離得到1個(gè)結(jié)構(gòu)新穎的含氯酚類化合物和6個(gè)已知的化合物，它們分別為2，6-二甲氧基苯甲酸(1)、仙茅苷(2)、仙茅苷乙(3)、仙茅素A(4)、2，4-二氯-5-羥基-3-甲基苯酚-1-O-β-D-比喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷，命名為仙茅素D(5)、3，3’，5，5’-四甲氧基-7，9’：7’，9-二環(huán)氧木脂素-4，4’-二-O-β

5、-D-葡萄糖苷(6)、β-谷甾醇(7)，其中仙茅素D為一含氯酚類新化合物。通過原代成骨細(xì)胞和誘導(dǎo)破骨細(xì)胞培養(yǎng)，對(duì)分離得到的酚及酚苷類化合物進(jìn)行活性篩選，結(jié)果發(fā)現(xiàn)酚苷類化合物能夠明顯地促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖和抑制破骨細(xì)胞抗酒石酸酸性磷酸酶活性，具有潛在的抗骨質(zhì)疏松活性。 采用HPLC-UV的方法對(duì)12個(gè)不同產(chǎn)地的仙茅樣品進(jìn)行指紋圖譜研究，并對(duì)其仙茅苷和仙茅苷乙的含量進(jìn)行測(cè)定，建立仙茅藥材的質(zhì)量評(píng)價(jià)方法。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同產(chǎn)地的仙茅樣品化學(xué)成

6、分差異較大，而且仙茅苷和仙茅苷乙的含量也有很大差異。 結(jié)果發(fā)現(xiàn)以云南峨山(CO-ES)樣品的仙茅苷含量最高，為0.538％，文山(CO-WS)樣品仙茅苷含量最低，為0.028％；云南宜良(CO-YL)樣品仙茅苷乙含量最高，為0.330％，重慶巴南(CO-BN)樣品仙茅苷乙含量含量最低，為0.103％。所分析樣品的采集于范圍在東經(jīng)102.06～106.87、北緯23.15～30.11、海拔315～1850m的生境中，不同產(chǎn)地的仙茅