杜香化學成分及抗炎止痛作用研究.pdf

1、杜香(Ledum palustre L.var.palustre)系杜鵑花科植物,主要分布在我國東北的長白山和大小興安嶺等地區(qū),野生杜香資源豐富。杜香含有豐富的次生代謝產(chǎn)物,具有藥用和芳香價值,是極具利用潛力的資源植物。本文首先對杜香及其變種寬葉杜香(Ledum palustre L.var.dilatatum Wahl.)進行系統(tǒng)的植化分析,并確立了在同一系統(tǒng)中提取杜香揮發(fā)油和杜香黃酮的技術(shù)路線。其工藝方法具體為:將杜香枝葉用水蒸氣蒸

2、餾后,殘渣烘干,用熱醇浸提法進一步提取杜香黃酮類化合物,得到的提取液合并濃縮,過大孔樹脂柱純化。
　　通過正交實驗法優(yōu)化,最終的技術(shù)參數(shù)為:熱醇提取,乙醇濃度60％,提取溫度80℃,溶劑體積40倍,提取4次,每次1h;濃縮浸膏用Hpd600樹脂過柱純化,選擇加樣量/大孔樹脂投量比1:20,吸附時間4 h,洗脫體積/柱體積比3倍,乙醇濃度60%,流速7 mL/min。用此方法提取、純化杜香黃酮,最終晶體得率為1.7g/100g生藥,

3、晶體中黃酮純度為88.0%。杜香黃酮和杜香精油分別用高效液相色譜法及氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)進行鑒定分析。高效液相色譜法比對發(fā)現(xiàn)杜香中含有蘆丁、楊梅素、槲皮素、山柰酚4種黃酮類化合物,生藥中黃酮總量達119.0±13.7 g/kg干重。寬葉杜香除以上4種化合物外還含有少量異鼠李素,生藥中黃酮總量達168.2±16.7 g/kg干重。氣相色譜-質(zhì)譜法鑒定的杜香精油主要成分有:對-傘花烴(26.54%),8-羥基-對-傘花烴(3.41%),1

4、-乙烯基環(huán)己醇(3.14%)等55種。寬葉杜香精油的主要成分有:對-傘花烴(23.97%),4-萜品醇(7.28%),1-乙烯基環(huán)己醇(2.42%),beta-萜品烯(1.50%),(+)-4-蒈烯(1.43%)等49種。包括烴類、醇類、酯類、醛類、酚類、環(huán)氧化合物和過氧化物7類,通過歸納分析,可以將所有組分按其主要碳骨架結(jié)構(gòu)分成5種。盡管植物生長的地理環(huán)境、氣候條件、采摘時間和提取方法都會對植物揮發(fā)油組分產(chǎn)生較大的影響,但同種植物揮發(fā)

5、油組分的基本碳骨架結(jié)構(gòu)是相同的。
　　以氣相色譜-質(zhì)譜為平臺,歸納不同來源揮發(fā)油組分的碳骨架結(jié)構(gòu)和特征峰,既能獲得同種植物揮發(fā)油的基本組成,又能針對不同來源、不同加工工藝的樣品以細致區(qū)分。杜香是傳統(tǒng)的藥用植物,但針對其各提取部分的物質(zhì)基礎(chǔ)及現(xiàn)代藥理藥效分析尚未有充分、系統(tǒng)的研究。本實驗通過醋酸誘導小鼠扭體反應模型和角叉菜膠誘導小鼠足趾腫脹模型比較杜香不同提取部位的急性鎮(zhèn)痛、抗炎作用,以期用現(xiàn)代生物學手段在其傳統(tǒng)用法基礎(chǔ)上找到新的有

6、效部位和新的適用癥。結(jié)果顯示,甲醇提取物(10.0 mg/kg、1.0 mg/kg)和水提物(10.0 mg/kg)能顯著抑制醋酸引起的小鼠扭體反應和角叉菜膠引起的小鼠足趾水腫。水提物(10.0 mg/kg)在致炎后2-4h內(nèi)效果接近非甾醇類抗炎藥吲哚美辛。高效液相色譜結(jié)果提示甲醇提取物的鎮(zhèn)痛抗炎效果可能通過其所含黃酮類化合物實現(xiàn)。后續(xù)工作將進一步分離杜香黃酮類化合物,以闡明其藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)。并圍繞黃酮類化合物已知的生物活性,開展現(xiàn)代藥