TGF-β1和β-catenin基因在病理性瘢痕中的表達及意義.pdf

1、目的：
　　 病理性瘢痕是人體皮膚組織損傷后的一種纖維過度增生性疾病,分為增生性瘢痕和瘢痕疙瘩兩種類型。病理性瘢痕不僅是局部形態(tài)的改變,瘢痕過度收縮還能引起器官的功能障礙,特別是發(fā)生于頭頸部者可造成面容畸形、器官移位和功能障礙,目前已成為困擾整形外科臨床治療中日益突出的問題,因此對尋求病理性瘢痕的治療方法迫在眉睫。病理性瘢痕的發(fā)病機制十分復雜,細胞因子、膠原代謝、基因表達和細胞的增殖凋亡等均成為學者們對病理性瘢痕發(fā)生機制的研究熱

2、點,但其發(fā)病機制并不能由單一因素解釋而是多種因素共同作用的結果。本實驗通過研究TGF-β1和β-catenin基因在病理性瘢痕中的表達情況,探討TGF-β/Smad信號通路與Wnt/β-catenin信號通路在病理性瘢痕發(fā)病機制中的作用及相互關系,為臨床對瘢痕的預防和治療提供新線索。
　　 方法：
　　 隨機選取瘢痕疙瘩患者22例為A組,增生性瘢痕患者29例為B組,同時選取其他整形美容手術患者切除的正常皮膚組織18例,作

3、為對照C組。取200mg組織剪碎,加入Trizol充分混勻,室溫靜置;分別加入氯仿、異丙醇,12000rpm離心,棄上清后加入預冷的乙醇,離心棄上清,室溫干燥5min,將沉淀溶于20μL DEPC水中。紫外分光光度計測定A260/A280比值確定RNA濃度。采用10μL逆轉錄反應體系,反應時間50min;取cDNA1μL加入設計好的引物及試劑盒藥品后,94℃預變性5min,94℃變性30s,56℃45s,72℃1min;PCR擴增35個

4、循環(huán),72℃充分延伸10min,4℃保存。取PCR產物進行凝膠電泳后,凝膠成像系統(tǒng)攝像,軟件分析各條帶與內參條帶灰度值,其比值表示TGF-β1、β-catenin mRNA轉錄水平。應用spss12.0軟件進行統(tǒng)計學分析,各組結果均表示為均數士標準差(-x±s),各組資料間采用單因素方差分析和SNK檢驗,P＜0.05被認為有統(tǒng)計學意義。
　　 結果：
　　 TGF-β1mRNA在A、B組中呈高表達,與C組比較,差異有統(tǒng)計

5、學意義(P＜0.01),但A、B兩組之間比較,無明顯統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。
　　 β-catenin mRNA在A、B組中呈高表達,與C組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01),但A、B兩組之間比較,無明顯統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。
　　 結論：
　　 一、TGF-β1基因表達增高是病理性瘢痕等纖維化疾病的重要機制之一,即TGF-β/Smad信號轉導通路對病理性瘢痕的形成起到重要作用。
　　 二、