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1、目的:病理性瘢痕包括增生性瘢痕(hypertrophic scar,HS)和瘢痕疙瘩(keloid,K),其發(fā)病機(jī)制尚未完全清楚。目前,國(guó)內(nèi)外學(xué)者普遍認(rèn)為,病理性瘢痕的形成與成纖維細(xì)胞(fibroblast,F(xiàn)b)過(guò)度增殖、分化以及其分泌產(chǎn)物——膠原為主的細(xì)胞外基質(zhì)在創(chuàng)傷處過(guò)度沉積有關(guān)。其發(fā)病機(jī)制是醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的重要課題。本研究通過(guò)比較病理性瘢痕與正常皮膚組織中SPARC是否存在差異,來(lái)探討SPARC在病理性瘢痕形成過(guò)程中所起的生物學(xué)作用及
2、意義。
方法:(1)病理性瘢痕患者63例,其中瘢痕疙瘩(瘢痕組)和增生性瘢痕組織(增生組)分別為31例、32例,另取正常皮膚組織10例為對(duì)照(對(duì)照組)。采用免疫組化SP法檢測(cè)三組組織中SPARC表達(dá)變化。(2)手術(shù)取病理性瘢痕和正常皮膚組織,按文獻(xiàn)方法進(jìn)行成纖維細(xì)胞原代培養(yǎng),待細(xì)胞融合后傳代。取4~6代傳代細(xì)胞,應(yīng)用蛋白印跡法(Western-blot)檢測(cè)病理性瘢痕及正常皮膚成纖維細(xì)胞中SPARC的變化。
3、結(jié)果:1.Western blot法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)病理性瘢痕和正常皮膚均有SPARC表達(dá)。
2、利用凝膠圖象處理系統(tǒng)分析,病理性瘢痕SPARC蛋白條帶和內(nèi)參照(β-actin)灰度值比值與正常皮膚SPARC蛋白條帶和內(nèi)參照(β-actin)灰度值比值存在差異。前者比值更大。所得數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,利用t檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)(P<0.05)差異有顯著性意義。
3、利用免疫組織化學(xué)法(SP法)對(duì)標(biāo)本染色后大體觀察發(fā)現(xiàn)病理性瘢痕兩種組
4、織均有SPARC的表達(dá)。SPARC呈散在分布,主要見(jiàn)于成纖維細(xì)胞、膠原纖維、平滑肌細(xì)胞、皮膚附件、浸潤(rùn)的炎性細(xì)胞和微血管內(nèi)皮細(xì)胞。兩種組織的表達(dá)分布沒(méi)有明顯差異。
4、病理性瘢痕中SPARC表達(dá),比正常皮膚增多,但差異無(wú)顯著性(P>0.05)。
結(jié)論:1、SPARC可能參與了病理性瘢痕和正常皮膚的發(fā)展過(guò)程。
2、病理性瘢痕中膠原纖維、平滑肌細(xì)胞、皮膚附件、浸潤(rùn)的炎性細(xì)胞和微血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖可能與
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