單核細(xì)胞趨化蛋白1、骨成形蛋白7在病理性瘢痕中的表達(dá)及意義.pdf

1、背景與目的：
　　 瘢痕做為人體創(chuàng)傷后組織修復(fù)過(guò)程中的必然產(chǎn)物,包括非病理性瘢痕(non-pathologic scar)和病理性瘢痕(pathologic scar)。一般情況下,非病理性瘢痕愈合較平整,不引起外觀和功能障礙。但是,當(dāng)瘢痕出現(xiàn)異常增生、突出皮面,常伴有瘙癢和疼痛,外形的毀損,影響外觀和功能,則稱為病理性瘢痕,包括增生性瘢痕(hypertrophic scar,HS)和瘢痕疙瘩(keloid,K)。目前認(rèn)為病理性

2、瘢痕屬于一類真皮纖維化疾病,其組織學(xué)特征是膠原纖維為主的細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix,ECM)的過(guò)度沉積。但其發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚,目前臨床治療方法主要有手術(shù)切除、局部加壓、藥物注射、放射線照射、激光和冷凍等療法,但均無(wú)特異性,難以達(dá)到理想的治療效果。探索病理性瘢痕過(guò)度增殖的發(fā)生機(jī)制,尋找有效抑制和治療的方法始終是整形外科研究領(lǐng)域的重要課題。
　　 以往的研究證實(shí)成纖維細(xì)胞過(guò)度增生及凋亡抑制、細(xì)胞外基質(zhì)的

3、合成與降解失調(diào)及大量生物活性因子的異常表達(dá)等在病理性瘢痕的形成過(guò)程中發(fā)揮重要的作用。單核細(xì)胞趨化蛋白1(monocyte chemoattraetant protein-1,MCP—1)是新近明確的對(duì)單核／巨噬細(xì)胞有趨化和激活雙重作用的趨化因子,MCP-1家族及其受體具有廣泛的細(xì)胞來(lái)源和生物學(xué)效應(yīng),在多種纖維增生性疾病的發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要作用。骨成形蛋白7(Bone morphogenetic proteins-7,BMP-7)系

4、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(transforming growth factor beta,TGF-β)超家族成員,近年來(lái)其作為一種新發(fā)現(xiàn)的組織纖維化負(fù)性調(diào)節(jié)因子逐漸成為抗組織纖維化治療的研究熱點(diǎn)。但MCP-1和BMP-7兩者對(duì)病理性瘢痕形成中組織纖維化作用的研究至今鮮有報(bào)道。本文通過(guò)研究MCP-1、BMP-7在病理性瘢痕中的表達(dá)水平及其相關(guān)性,探討其在病理性瘢痕形成過(guò)程中的作用和意義。
　　 材料與方法
　　 實(shí)驗(yàn)所用共99例組織

5、標(biāo)本均來(lái)自于2008年至2010年鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院整形外科住院手術(shù)患者,其中病理性瘢痕標(biāo)本55例,包括瘢痕疙瘩標(biāo)本25例,增生性瘢痕標(biāo)本30例；非病理性瘢痕標(biāo)本24例；正常皮膚標(biāo)本為美容手術(shù)切除和全厚皮片移植術(shù)后剩余的全厚皮共20例。取材的標(biāo)本均臨床診斷明確,術(shù)后經(jīng)常規(guī)病理檢驗(yàn)證實(shí),且標(biāo)本取材患者均無(wú)皮膚疾病、結(jié)締組織疾病、傳染性疾病、惡性腫瘤和其他重要臟器疾病,術(shù)前無(wú)放療、化療、激光治療及免疫治療史。切取的所有組織標(biāo)本用10％的甲

6、醛溶液固定,常規(guī)石蠟包埋,4pm連續(xù)切片。
　　 實(shí)驗(yàn)采用免疫組織化學(xué)方法(sp法)檢測(cè)MCP-1、BMP-7在25例瘢痕疙瘩、30例增生性瘢痕、24例非病理瘢痕和20例正常皮膚中的表達(dá)水平,以PBS液代替一抗做陰性對(duì)照。采用德國(guó)Lecia顯微照像系統(tǒng)進(jìn)行圖像采集,凝膠成像數(shù)字圖像處理系統(tǒng)V1.6對(duì)所采集圖像進(jìn)行分析。
　　 采用SPSS16.0數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。各組標(biāo)本中蛋白陽(yáng)性表達(dá)率采用x2檢驗(yàn)、x

7、2分割檢驗(yàn),MCP-1和BMP-7在病理性瘢痕中的表達(dá)關(guān)系采用Spearman關(guān)聯(lián)性分析。以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。
　　 結(jié)果
　　 1 MCP-1在病理性瘢痕中主要表達(dá)于成纖維細(xì)胞和部分內(nèi)皮細(xì)胞的胞質(zhì)和胞核中,呈棕黃色顆粒狀染色；非病理性瘢痕少量表達(dá),正常皮膚中偶見少數(shù)細(xì)胞呈陽(yáng)性反應(yīng)。
　　 2 BMP-7在正常皮膚的內(nèi)皮細(xì)胞的胞質(zhì)和部分胞核中陽(yáng)性表達(dá),呈棕黃色顆粒狀染色；非病理性瘢痕中部分陽(yáng)性表達(dá)；瘢痕疙瘩

8、、增生性瘢痕中偶見少數(shù)細(xì)胞呈陽(yáng)性反應(yīng)。
　　 3 MCP-1在瘢痕疙瘩(84.00％)、增生性瘢痕(76.67％)中的陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于非病理性瘢痕(29.17％)和正常皮膚組織(10.00％),差異有顯著性意義(P<0.0083)。
　　 4 BMP-7在瘢痕疙瘩(16.00％)、增生性瘢痕(23.33％)中的陽(yáng)性表達(dá)率顯著低于非病理性瘢痕(50.00％)和正常皮膚組織(80.00％),差異有顯著性意義
　　

9、(P<0.0083)。
　　 5 MCP-1和BMP-7在非病理性瘢痕和正常皮膚中的陽(yáng)性表達(dá)率無(wú)顯著性差異(P>0.0083),和病理性瘢痕中的陽(yáng)性表達(dá)率比較差異具有顯著性意義(P<0.0083)。
　　 6 MCP-1和BMP-7在病理性瘢痕中的表達(dá)呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.639,P<0.01)。
　　 結(jié)論
　　 1 MCP-1在病理性瘢痕中的高表達(dá)提示通過(guò)激活單核／巨噬細(xì)胞產(chǎn)生多種生長(zhǎng)因子,刺激成纖